一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法与流程
本发明涉及黄曲霉毒素评估，尤其涉及一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法。
背景技术：
1、真菌毒素是一种由丝状真菌产生的次生代谢产物，具有致癌性，黄曲霉毒素主要由丝状真菌黄曲霉和寄生曲霉产生，是致癌能力最强的化合物之一，对食用受污染食品的人或动物的健康产生不利影响，被认为是全世界十大最恐怖的真菌之一。
2、食品加工过程中主要的烹饪方式为热处理，热处理可以提高食品质量、营养价值和风味物质，其中煎炸水产品备受众多消费者的喜爱，而花生油具有较高的营养价值，所以煎炸水产品时多采用花生油。煎炸后水产品会进行包装，然后进行储藏，煎炸水产品在储藏期间受环境因素影响可能产生化学危害物质，比如煎炸水产品发生霉变产生真菌毒素，人或动物食用霉变的煎炸水产品会对健康产生不利影响。因此，开发煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法从而对黄曲霉毒素污染进行早起预警变得迫在眉睫。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，建立贝叶斯分类模型对煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素进行评估，在水产品中黄曲霉毒素污染的防控、监测、预警和风险评估方面起到重要作用。
2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，包括以下步骤：
4、(1)将清理好的水产品放入油温为120-130℃的食用油中煎炸，炸至表面为金黄色捞出；
5、(2)将捞出的水产品冷却至室温后，放入温度为25-30℃的储藏箱中进行储藏30天；
6、(3)对储藏期间的水产品进行取样，用高速粉碎机将样品粉碎，过筛，使其粒径小于2mm，加入提取溶剂，高速震荡后离心，取上清液；
7、(4)将获得的上清液通过免疫亲和柱净化和富集，净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离，得到分离产物；
8、(5)将分离产物进行串联质谱检测，对其进行毒素含量标定，从而获得煎炸水产品的黄曲霉毒素的含量；
9、(6)根据煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素含量进行评估，从而进行早期预警。
10、进一步地，在步骤(1)中，食用油的具体制作步骤为：按料液比为1.00g：5.00ml加入正己烷，在45℃水浴中进行搅拌浸提4.5h，抽滤分离固体残渣，将其旋转蒸发以除去正己烷，然后加热至115℃脱水得到食用油。
11、进一步地，食用油为花生油、菜籽油、玉米油、大豆油中的任意一种。
12、进一步地，在步骤(3)中，取样为在储藏的第5、10、15、20、25、30天对煎炸水产品进行取样。
13、进一步地，在步骤(3)中，加入提取溶剂的具体操作为：每10.00样品加入200μl同位素内标工作液，静置35min后加入40.00ml乙腈水溶液或甲醇水溶液，涡旋均匀。
14、进一步地，在步骤(3)中，高速震荡的频率为1800次/min，时间为20min，离心速度为6000r/min，离心时间为8min。
15、进一步地，乙腈-水溶液的体积比为83：15，甲醇-水溶液的体积比为6：2。
16、进一步地，在步骤(4)中，液相色谱分离的流动相为：6mmol/l乙酸溶液和乙腈-甲醇溶液，乙腈-甲醇体积比为1:1。
17、进一步地，在步骤(4)中，液相色谱分离的流速为0.3ml/min，液相色谱柱为c18柱，液相色谱柱的温度为40℃，进样体积为10μl。
18、本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
19、本发明采用液相色谱-串联质谱法进行测量黄曲霉毒素含量，主要对储藏期间的煎炸水产品进行测定，为更加准确评估煎炸水产品受黄曲霉毒素污染情况提供可靠的早期预警。
技术特征：
1.一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(1)中，食用油的具体制作步骤为：按料液比为1.00g：5.00ml加入正己烷，在45℃水浴中进行搅拌浸提4.5h，抽滤分离固体残渣，将其旋转蒸发以除去正己烷，然后加热至115℃脱水得到食用油。
3.根据权利要求2所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：食用油为花生油、菜籽油、玉米油、大豆油中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(3)中，取样为在储藏的第5、10、15、20、25、30天对煎炸水产品进行取样。
5.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(3)中，加入提取溶剂的具体操作为：每10.00样品加入200μl同位素内标工作液，静置35min后加入40.00ml乙腈水溶液或甲醇水溶液，涡旋均匀。
6.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(3)中，高速震荡的频率为1800次/min，时间为20min，离心速度为6000r/min，离心时间为8min。
7.根据权利要求6所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：乙腈-水溶液的体积比为83：15，甲醇-水溶液的体积比为6：2。
8.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(4)中，液相色谱分离的流动相为：6mmol/l乙酸溶液和乙腈-甲醇溶液，乙腈-甲醇体积比为1:1。
9.根据权利要求1所述的一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，其特征在于：在步骤(4)中，液相色谱分离的流速为0.3ml/min，液相色谱柱为c18柱，液相色谱柱的温度为40℃，进样体积为10μl。
技术总结
本发明提供一种煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素评估方法，属于黄曲霉毒素评估技术领域，包括以下步骤：将清理好的水产品放入油温为120‑130℃的食用油中煎炸，炸至表面为金黄色捞出；将捞出的水产品冷却至室温后，放入温度为25‑30℃的储藏箱中进行储藏30天；对储藏期间的水产品进行取样，用高速粉碎机将样品粉碎，过筛，使其粒径小于2mm，加入提取溶剂，高速震荡后离心，取上清液；将获得的上清液通过免疫亲和柱净化和富集，净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离，得到分离产物；将分离产物进行串联质谱检测，对其进行毒素含量标定，从而获得煎炸水产品的黄曲霉毒素的含量；根据煎炸水产品储藏期间黄曲霉毒素含量进行评估，从而进行早期预警。
技术研发人员：马华威,郭爱玲,吕敏,尹涛,蒋光正,牙诗雅,罗旭
受保护的技术使用者：广西壮族自治区水产科学研究院（广西壮族自治区渔业病害防治环境监测和质量检验中心、广西壮族自治区水生野生动物救护中心）
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5