miR-92b作为靶标在开发肾纤维化药物或制备肾纤维化动物模型中的应用的制作方法
本发明属于生物医药领域，涉及mir-92b作为靶标在开发肾纤维化药物或制备肾纤维化动物模型中的应用，具体来说，涉及mir-92b作为促进靶标在开发肾纤维化药物中的应用或mir-92b作为抑制靶标在制备肾纤维化动物模型中的应用。
背景技术：
1、肾纤维化是几乎所有进行性慢性肾脏疾病(ckd)的共同病理特征，包括糖尿病肾病(dkd)和阻塞性肾病，其过程极大地削弱了肾脏的再生潜能，导致期功能下降。目前，尚无经批准的治疗肾纤维化的有效方法。因此，提高对肾纤维化的细胞和分子机制的理解是至关重要的，不仅对这一过程的发病机制有新的认识，而且对纤维化肾病患者的治疗也有合理的策略。
2、在肾纤维化过程中，转化生长因子-β(tgf-β)在间质慢性炎症改变和细胞外基质(ecm)积累中起关键作用。tgf-β1可通过激活标准的(基于smad)和非标准的(非基于smad)信号通路诱导肾纤维化，导致肌成纤维细胞激活，ecm过度产生，并抑制ecm降解。活化的smad复合体进入细胞核并转录纤维化相关蛋白，如i型胶原(col1a1)和平滑肌肌动蛋白(sma)。在纤维化过程中，smad3需要磷酸化才能实现核易位和靶基因的转录调控。
3、微小rna(mirna)是研究最多的一类非编码小rna。
4、调控tgf-b 1信号通路活性的关键microrna尚未被阐明。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供mir-92b作为靶标在开发肾纤维化药物或制备肾纤维化动物模型中的应用。
2、本发明提供了mir-92b相关生物材料的应用，其特征在于：所述应用为在制备肾纤维化药物中的应用。
3、示例性的，mir-92b相关生物材料可为mir-92b(一种mirna)。
4、示例性的，mir-92b相关生物材料可为mir-92b的前体rna。
5、示例性的，mir-92b相关生物材料可为mir92b类似物。
6、示例性的，mir-92b相关生物材料可为特异dna分子；所述特异dna分子转录得到mir-92b。
7、示例性的，mir-92b相关生物材料可为特异dna分子；所述特异dna分子转录得到mir-92b的前体rna。
8、示例性的，mir-92b相关生物材料可为特异dna分子；所述特异dna分子转录得到的rna中具有mir-92b。
9、示例性的，mir-92b相关生物材料可为特异dna分子；所述特异dna分子转录得到rna中具有mir-92b的前体rna。
10、示例性的，mir-92b相关生物材料可为重组质粒或重组病毒。
11、示例性的，所述重组质粒可为具有以上任一所述的特异dna分子的重组质粒。
12、示例性的，所述重组病毒可为具有以上任一所述的特异dna分子的重组病毒。
13、示例性的，所述重组病毒可为重组腺相关病毒。
14、示例性的，所述重组病毒可为重组avv9病毒。
15、mir-92b如seq id no：1所示(单链rna分子)。
16、mir-92b的前体rna如seq id no：2所示(单链rna分子)。
17、mir92b类似物(mir92b mimic)为双链rna分子，一条链为如seq id no：5所示，另一条链如seq id no：6所示。
18、示例性的，所述特异dna分子如seq id no：4所示。
19、本发明还保护一种应用，其特征在于：所述应用为以mir-92b为抑制靶标的生物材料在制备肾纤维化动物模型中的应用。
20、本发明还保护一种应用，其特征在于：所述应用为以动物基因组中的mir-92b编码基因为敲除靶标的生物材料在制备肾纤维化动物模型中的应用。
21、示例性的，以动物基因组中的mir-92b编码基因为敲除靶标的生物材料可为利用crispr/cas9技术进行敲除的生物材料。
22、示例性的，以动物基因组中的mir-92b编码基因为敲除靶标的生物材料可为利用crispr/cas9双靶点进行敲除的生物材料。
23、所述敲除靶标具体如seq id no：3所示。
24、以mir-92b为抑制靶标的生物材料具体可为mir-92b抑制剂。
25、示例性的，mir-92b抑制剂为seq id no：7所示的单链rna分子。
26、本发明通过实验验证了如下内容：mir-92b敲除加重uuo模型小鼠和uiri模型小鼠的肾纤维化；过表达mir-92b抑制uuo模型小鼠的肾纤维化。因此，mir-92b的相关生物材料可用于肾纤维化的治疗和/或预防，以mir-92b为抑制靶标的生物材料可用于肾纤维化动物模型的制备(与现有技术中的uuo模型以及uiri模型相比，该模型具有更加严重的肾纤维化症状)。在发现mir-92b对肾纤维化的相关功能的基础上，发明人进一步通过生物信息学分析、rna测序分析、荧光素酶报告基因测定、qpcr分析和western blotting等实验方法，证实了mir-92b直接靶向tgf-β受体1(tgfbr1)，从而通过抑制tgf-β/smad3信号通路改善肾纤维化。
技术特征：
1.一种应用，其特征在于：所述应用为mir-92b在制备肾纤维化药物中的应用；mir-92b如seq id no：1所示。
2.一种应用，其特征在于：所述应用为mir-92b的前体rna在制备肾纤维化药物中的应用；mir-92b的前体rna如seq id no：2所示。
3.一种应用，其特征在于：所述应用为mir92b类似物在制备肾纤维化药物中的应用；mir92b类似物为双链rna分子，一条链为如seq id no：5所示，另一条链如seq id no：6所示。
4.一种应用，其特征在于：所述应用为特异dna分子在制备肾纤维化药物中的应用；所述特异dna分子转录得到mir-92b；mir-92b如seq id no：1所示。
5.一种应用，其特征在于：所述应用为特异dna分子在制备肾纤维化药物中的应用；所述特异dna分子转录得到mir-92b的前体rna；mir-92b的前体rna如seq id no：2所示。
6.一种应用，其特征在于：所述应用为特异dna分子在制备肾纤维化药物中的应用；所述特异dna分子转录得到的rna中具有mir-92b；mir-92b如seq id no：1所示。
7.一种应用，其特征在于：所述应用为特异dna分子在制备肾纤维化药物中的应用；所述特异dna分子转录得到rna中具有mir-92b的前体rna；mir-92b的前体rna如seq id no：2所示。
8.一种应用，其特征在于：所述应用为重组质粒或重组病毒在制备肾纤维化药物中的应用；所述重组质粒中具有权利要求4至7中任一所述的特异dna分子；所述重组病毒中具有权利要求4至7中任一所述的特异dna分子。
9.一种应用，其特征在于：所述应用为以mir-92b为抑制靶标的生物材料在制备肾纤维化动物模型中的应用。
10.一种应用，其特征在于：所述应用为以动物基因组中的mir-92b编码基因为敲除靶标的生物材料在制备肾纤维化动物模型中的应用。
技术总结
本发明公开了miR‑92b作为靶标在开发肾纤维化药物或制备肾纤维化动物模型中的应用。本发明提供了miR‑92b相关生物材料的应用，其特征在于：所述应用为在制备肾纤维化药物中的应用。miR‑92b相关生物材料可为miR‑92b、miR‑92b的前体RNA、miR92b类似物或转录得到miR‑92b或miR‑92b的前体RNA的特异DNA分子。miR‑92b的相关生物材料可用于肾纤维化的治疗和/或预防，以miR‑92b为抑制靶标的生物材料可用于肾纤维化动物模型的制备。
技术研发人员：梁真,杨书,康林,杨广燕,李丽杏
受保护的技术使用者：深圳市人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5