鸡球虫喷滴免疫用载体组合物及使用方法和鸡球虫喷滴免疫组合物与流程

1.本发明涉及一种球虫免疫用载体，具体地说，涉及一种鸡球虫喷滴免疫用载体组合物及使用方法和鸡球虫喷滴免疫组合物。


背景技术：

2.免疫是生物体的一种生理功能，可以抵抗或防止微生物或寄生物的感染或其它所不希望的生物侵入的状态。通过免疫手段可以以较小的代价获取最大的保护。鸡球虫病是一种危害极为严重的全球性寄生虫病，由顶复门孢子纲艾美耳属的一种或多种艾美耳球虫寄生于鸡肠道黏膜上皮内，引起腹泻、血便、生长迟缓等影响鸡只生产发育甚至死亡，每年都给养鸡业造成巨大经济损失。以前鸡球虫病的药物治疗主要依靠在饲料或饮水中添加抗球虫药物，但是，球虫耐药性问题引发愈来愈烈的减抗、替抗的浪潮，以及随着上市球虫疫苗安全性和有效性已逐步获得市场认可，使用球虫疫苗预防鸡球虫病成为大势所趋。鸡球虫疫苗免疫方法包括饮水、拌料、滴口、喷雾、喷滴等方法。饮水免疫是将球虫疫苗与助悬剂加水混合均匀后，供雏鸡饮用而得以免疫，因为鸡球虫疫苗，例如鸡球虫卵囊疫苗，的密度大于1g/cm3，一般需要加入一定量的增稠、助悬剂来悬浮球虫卵囊。饮水免疫操作相对简单，但是对于规模逐渐扩大的集约化养鸡场则缺点明显，饲养人员的劳动强度相对较大。孵化场和大规模集约化养鸡场适宜使用劳动强度小的喷雾、喷滴等免疫方法，传统喷雾免疫喷出的雾滴过小，虽然较容易粘附于羽毛上，但也容易因水分蒸发造成鸡只的失温现象，而且部分雾滴悬浮在空气中造成的浪费也不容忽视。
3.喷滴免疫是将疫苗与助悬剂混合后经喷滴设备喷出液滴附着在鸡毛上供鸡啄食而得以免疫，液滴较大，易于啄食，是一种切实可行的鸡球虫疫苗免疫方法。中国专利申请公开号cn109432006a(发明名称“一种球虫疫苗喷滴免疫用佐剂及其应用”)、中国专利申请公开号cn107625959a(发明名称“喷滴或饮水免疫用鸡球虫疫苗稳定剂及其制备方法和应用”)、中国专利申请公开号cn110448528a(发明名称“一种免疫用助悬剂、疫苗悬液制备及喷滴免疫方法”)和中国专利申请公开号cn210496889u(发明名称“一种疫苗喷淋免疫装置”)分别公开了用于喷滴免疫的助悬剂及其在喷滴免疫方法或喷滴免疫的设备。所使用的助悬剂和/或佐剂可使得鸡球虫疫苗卵囊均匀悬浮在水中，并通过喷滴使得包含鸡球虫卵囊的液滴滴落到雏鸡羽毛上被雏鸡啄食(雏鸡具有啄食的习性，会自发的啄食自身或其它雏鸡羽毛上的液滴)。与喷雾相比，液滴相对较大，因水的蒸发造成的鸡的失温问题不严重，但是因为其液滴(胶滴)较大，在小鸡啄食或运动时，部分的液滴容易滑落，造成部分疫苗液滴不能被雏鸡第一时间啄食，对疫苗的使用有效性造成一定的影响。上述现有技术使用的用于悬浮鸡球虫卵囊的液滴是一种溶胶，具有一定的粘度，但是仍然具有较大的流动性，在雏鸡活动过程中部分胶滴滑落，造成浪费。
4.因此，需要一种用于鸡球虫喷滴疫苗时能更好地附着在雏鸡羽毛上的鸡球虫疫苗载体。


技术实现要素：

5.针对现有技术中用于悬浮鸡球虫疫苗的载体介质存在的缺点，本发明的目的是提供一种用于鸡球虫喷滴疫苗时能使疫苗更好地附着在小鸡羽毛上的载体组合物。该载体组合物包括以下组分：
6.a组分，其包括可溶性金属盐和不与上述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂，该可溶性金属盐为二价或多价金属盐，
7.b组分，其包括在水中与a组分中的可溶性金属盐作用形成凝胶的凝胶剂，
8.其中a组分中的可溶性金属盐和b组分中的凝胶剂的质量比为10:1～1:100，
9.其中所述a组分的水溶液与所述b组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。
10.优选地，上述鸡球虫疫苗优选鸡球虫卵囊疫苗。
11.更优选地，上述a组分中的可溶性金属盐和b组分中的凝胶剂的质量比为5:1～1:10。
12.进一步优选地，上述a组分中的可溶性金属盐和b组分中的凝胶剂的质量比为1:1～1:5。
13.优选地，上述b组分中的与a组分中的可溶性盐在水中可形成凝胶的凝胶剂在没有a组分的可溶性金属盐存在下可以使水增稠。
14.优选地，上述用于形成凝胶的凝胶剂选自海藻酸盐和低酯果胶中的一种或多种。
15.优选地，上述海藻酸盐选自藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸铵和海藻酸镁中的一种或多种。
16.优选地，上述低酯果胶选自从苹果、柑橘皮中提取的果胶。
17.优选地，上述a组分中不与所述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂选自黄原胶、瓜尔胶、阿拉伯胶、魔芋胶、桃胶中的一种或多种。
18.优选地，上述b组分还可以包含增稠剂，用于使水增稠。
19.优选地，上述b组分中的所述增稠剂优选自黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶、阿拉伯胶、桃胶、黄耆胶、刺梧桐胶、果胶、明胶、魔芋胶、纤维素胶或其衍生物中的一种或多种。
20.上述纤维素胶选自羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素。
21.优选地，上述b组分中的增稠剂与a组分中的增稠剂相同。
22.优选地，上述a组分、b组分还分别包括稀释剂、流动调节剂和可食用色素中的一种或多种。
23.优选地，上述稀释剂选自葡萄糖、氯化钠、无水硫酸钠中的一种或多种。
24.优选地，上述流动调节剂选自气相二氧化硅、沉淀二氧化硅和空心硅球中的一种或多种。
25.优选地，上述二价金属盐选自钙盐、锌盐。
26.优选地，上述钙盐选自氯化钙、硝酸钙、葡萄糖酸钙、溴化钙、碘化钙、磷酸二氢钙、碳酸氢钙、硫酸氢钙、硫酸钙、亚硫酸氢钙、次氯酸钙、氯酸钙、高氯酸钙中的一种或多种的混合物。
27.优选地，上述锌盐选自氯化锌、硝酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌中的一种或多种的混合物。
28.所述多价盐选自铁盐(例如al
3+
盐)、铝盐(例如fe
3+
)。
29.进一步地，所述铁盐选自氯化铁、硫酸铁、硝酸铁中的一种或多种的混合物，
30.进一步地，所述铝盐选自氯化铝、硫酸铝、硝酸铝中的一种或多种的混合物
31.优选地，上述二价或多价金属的盐还可以是含有上述二价或多价金属的复盐。
32.优选地，所述复盐选自硫酸铝钾(明矾)、铁铵矾。
33.本发明另一方面提供了上述鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的使用方法，所述使用方法包括以下步骤：
34.(1)将a组分溶解到水中，得到有粘性的a组分水溶液；
35.(2)将b组分溶解到水中，得到有粘性的b组分水溶液；
36.(3)将鸡球虫疫苗加入a组分水溶液和/或b组分水溶液中，得到包含鸡球虫疫苗的a组分水溶液和/或b组分水溶液，或者将鸡球虫疫苗加入到用于配制a组分水溶液和/或b组分水溶液的水中，然后向其中分别加入相应的a组分或b组分，得到包含鸡球虫疫苗的a组分水溶液和/或b组分水溶液；以及
37.(4)将步骤(3)得到的最终的a组分水溶液和b组分水溶液分别依次或同时向小鸡喷滴，两种溶液在喷出后混合，并在鸡的羽毛上原位形成凝胶，粘附在小鸡羽毛上，供小鸡啄食，获得对鸡球虫的免疫。
38.优选地，上述水为硬度小于200的水。
39.更优选地，上述水为去离子水或纯水。
40.优选地，用于喷射a组分水溶液和b组分水溶液的喷嘴的间距为0.1mm～2mm；进一步有关0.2-0.5mm。
41.优选地，所述喷嘴为嵌套式，一种溶液从芯流出，另一种溶液从四周流出，保证一经流出即能接触。
42.优选地，用于喷射a组分水溶液和b组分水溶液的喷嘴距放置雏鸡平台的竖直距离为10-50cm。
43.作为优选，为了能使得包含鸡球虫疫苗，例如鸡球虫卵囊疫苗的a组分水溶液、b组分水溶液能从喷嘴顺利喷出，并具有一定悬浮鸡球虫卵囊的能力，使得在一般6h以内的时间内不会产生明显的沉降，造成明显的喷出的不均匀的问题，对于配制的a组分水溶液、b组分水溶液的粘度分别为10mpa.s～500mpa.s(旋转粘度计6rpm下测量)；对于a组分水溶液和/或b组分水溶液，本身含有一定的增稠剂组分，可起到一定的助悬作用，可以使得球虫卵囊在其中悬浮一定时间不发生明显的沉降；但是对于喷滴免疫，悬浮液一般是要持续地搅拌情况下通过机器进行喷滴的，因此对于其助悬效果的要求不像饮水免疫那么高。对于饮水免疫，其饮水时间一般较长，可至6h左右，因此需要满足至少6h的鸡的球虫卵囊不会发生明显的沉降；但是对于喷滴免疫，一般使用时间较短，且在使用时料液可以一直维持搅拌等状态，鸡的球虫卵囊不易发生沉降；因此整体来说对于所配制的a组分水溶液、b组分水溶液的粘度、助悬要求较低，因此对于所述溶液的粘度进一步优选为15mpa.s～200mpa.s；进一步优选25mpa.s～100mpa.s。
44.在使用时，对于a组分水溶液和b组分水溶液从喷嘴喷出，在a组分水溶液和b组分水溶液接触后，首先在接触面，a组分水溶液中的二价或多价离子(以ca
2+
为例说明)会与b组分中的海藻酸根离子(以海藻酸钠为例进行说明)接触，产生一定的凝胶化，但是因为a组分
本身有一定的粘度，控制了钙离子的移动速度，因此海藻酸钠的凝胶作用仅能一定程度的发生；而当a组分水溶液、b组分水溶液组合成的胶滴一起掉落至鸡的羽毛上时，因为a组分水溶液、b组分水溶液相对较大的剪切速度(从滴落到鸡羽毛前的速度到几乎完全静止状态)会使得胶滴粘度显著降低(剪切变稀)，使得少量胶滴渗入羽毛，并在此过程a组分水溶液和b组分水溶液有较充分的混合，此时钙离子与海藻酸根离子可以快速发生凝胶化。这样，一方面由于凝胶本身对羽毛有黏附作用，另一方面由于少量羽毛被包裹进凝胶，大大提高了在羽毛上的黏附，不会使得其轻易跌落。并且仅仅是十分少的羽毛包裹，并不会引起小鸡的啄食的困难，小鸡的啄食时不会引起小鸡的明显的应激反应。从而可以大大提高凝胶被啄食的比例，有效提高免疫效果。
45.作为优选可以在a组分和/或b组分中包含可食用色素，这样配制的a组分溶液和/或b组分溶液可以具有颜色，一方面可以引起小鸡的注意；另一方面为了便于观察，特别是凝胶化的过程。
46.本发明再一方面提供了一种鸡球虫喷滴免疫组合物，该组合物包括以下组分：
47.a组分，其包括可溶性金属盐，和不与所述可溶性盐作用生成凝胶的增稠剂，所述可溶性金属盐为二价或多价金属盐；
48.b组分，其包括在水中与所述a组分中可溶性金属盐作用形成凝胶的凝胶剂，和
49.鸡球虫疫苗，
50.其中a组分中所述可溶性金属盐和b组分中所述凝胶剂的质量比为10:1～1:100，
51.其中所述a组分的水溶液与所述b组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。
52.本发明再一方面提供了一种鸡球虫喷滴免疫组合物，该组合物包括以下组分
53.a组分，其包括可溶性金属盐(所述可溶性金属盐为二价或多价金属盐)和不与所述可溶性盐作用生成凝胶的增稠剂，稀释剂、流动调节剂和可食用色素中的一种或多种；
54.b组分，其包括在水中与所述可溶性金属盐作用形成凝胶的海藻酸盐、增稠剂、稀释剂、流动调节剂和可食用色素中的一种或多种和
55.鸡球虫疫苗，
56.其中所述可溶性金属盐和海藻酸盐的质量比为10:1～1:100，
57.其中所述a组分的水溶液与所述b组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。
58.本发明的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物可用水形成包裹鸡球虫疫苗的凝胶，在小鸡羽毛上的粘附性比较好，且不易脱落。这是因为a组分水溶液和b组分水溶液是在达到鸡的羽毛上后少量渗入小鸡的羽毛之后才形成凝胶(在小鸡羽毛上原位形成凝胶)，对羽毛有锁死功能，更不易掉落。且凝胶具有很好的保水性，使得鸡球虫疫苗的活性保持时间更长，效果更好。
59.而且由于形成的凝胶具有锁水功能，水分不容易进入到鸡的羽毛或进入皮肤，减少失温现象的发生，并且可以保护里面的鸡的球虫疫苗。
60.且a组分本身配制的溶液时具有一定的粘性和触变性的，在其中的钙离子等与b组分的海藻酸钠等结合后，a组分的大部分也被包裹在凝胶中，即使少量的没有被包裹在凝胶中的部分因为自身的粘度及触变性，也不会轻易造成水渗入羽毛、接触皮肤，减少了失温现
象的发生；另外对于这种形成的凝胶其中用于显色的染料同样因为上述的原因不易与鸡的皮肤接触，减少了鸡的皮肤被染色的可能。
附图说明
61.图1是现有技术的疫苗喷淋免疫装置，该装置中只是料液改为a组合物的溶液和b组合物的溶液，出料的针头改为双针头或套针针头，即实现两种溶液同时喷滴，并在喷滴出来以后实现形成。
62.图2是用于本发明的一个实施例的鸡球虫喷滴免疫组合物的装置的结构示意图，其中1表示小鸡平台，2表示用于存储a组分水溶液的容器，2’表示用于存储b组分水溶液的容器，3表示泵送a组分水溶液的泵，3’表示泵送b组分水溶液的泵，4表示喷滴a组分水溶液的针头，4’表示喷滴b组分水溶液的的针头。
63.图3是将本发明的鸡球虫喷滴免疫药物组合物喷滴在小鸡身上以后的实际效果图。
具体实施方式
64.针对现有技术中用于鸡球虫喷滴疫苗用介质存在的缺点，本技术发明人经过深入的研究发现与溶胶相比凝胶具有锁水效应，即凝胶中的水分相对溶胶不易流失，粘附于小鸡的羽毛甚至接触小鸡皮肤上也不会造成明显的失温现象。而且凝胶对水分的保持作用大大增大了鸡球虫疫苗，例如鸡球虫卵囊疫苗在其中的活性保持时间。但是凝胶的流动性更接近固体，流动性较溶胶液体差得多，不便从装置中喷滴出来，不方便使用，特别是不能方便的用于喷滴免疫装置。而且凝胶在鸡的羽毛上的直接粘附也有很大问题，在凝胶形成以后，再接触小鸡的羽毛上，很难直接粘附上面。因此若能将鸡球虫疫苗先加入凝胶形成前的液体(溶胶)中，使包含鸡球虫卵囊疫苗的液体从装置中喷滴出来以后，在到达小鸡羽毛之后在羽毛上原位形成凝胶，所形成的凝胶除了有单纯的凝胶的对羽毛的粘附，而且在凝胶原位形成过程中，会包裹少量的羽毛，起到减少脱落的目的，就可以到达鸡球虫疫苗在鸡羽毛上不易滑落、利用率高、使用方便的效果。在此基础上完成了本发明。
65.本发明的描述中“雏鸡”和“小鸡”都是指1-30日龄的鸡，进一步是指1-14日龄的鸡。
66.本发明的描述中，a组分的增稠剂虽然在水中不与二价盐或多价盐作用生成凝胶，但是当加入水中时，其可以使水增稠。b组分中的增稠剂的目的是使水增稠，可与上述二价盐或多价盐作用凝胶，也可以不与上述二价盐或多价盐作用形成凝胶。
67.海藻酸盐是常用的增稠、助悬剂，在水中可以形成溶胶状液体，但是将其应用在高硬度水时则会因为钙离子的作用形成凝胶，使其不能方便应用于喷滴免疫。但是凝胶的相对稳定的结果又可以在免疫中发挥作用。若能将凝胶在小鸡羽毛上原位生成，不易脱落，则可以有效用于雏鸡的免疫。本发明中用于与二价离子和/或多价离子形成凝胶的海藻酸盐包括但不局限于藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸铵和海藻酸镁。
68.本发明的描述中，“多种”指两种或两种以上。
69.本发明的描述中，作为鸡球虫疫苗包括但不局限于鸡球虫卵囊疫苗。
70.本发明的描述中，“可溶性盐”是指可溶于水的盐。
71.本发明的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物中，a组分的“二价或多价金属盐”是指二价或二价以上的金属盐，包括但不局限于钙、锌、铜、铁等金属的可溶性盐，进一步优选钙、锌等二价金属可溶性盐。这样的二价金属盐包括但不局限于氯化钙、硝酸钙、葡萄糖酸钙、溴化钙、碘化钙、磷酸二氢钙、碳酸氢钙、硫酸氢钙、硫酸钙、亚硫酸氢钙、次氯酸钙、氯酸钙、高氯酸钙、硫酸钙、氯化锌、硝酸锌、葡萄糖酸锌、硫酸锌中的一种或多种。优选氯化钙、硫酸钙、硝酸钙、葡萄糖酸钙中的一种或多种。
72.这样的二价以上的金属盐包括但不局限于铝盐(例如al
3+
盐)、铁盐(例如fe
3+
盐)。具体为，氯化铝、硫酸铝、硝酸铝、氯化铁、硫酸铁、硝酸铁中的一种或多种的混合物。
73.优选的，上述二价或多价金属的盐还可以是含有上述二价或多价金属的复盐；进一步优选的硫酸铝钾(明矾)、铁铵矾。
74.a组分中不与上述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂因为其粘度的特性产生两方面的有益效果：一方面这些增稠剂本身遇水能产生一定的粘度，自身可以悬浮鸡球虫卵囊；另一方面在与海藻酸钠接触时减缓了凝胶的生成速度，使其不会在下降过程中凝胶化过程已经完成，而是使得部分的凝胶化过程是在掉落到羽毛上后形成，不容易滑落。若a组分水溶液中仅有金属盐，a组分的水溶液滴落在小鸡羽毛上面，在钙离子与海藻酸钠形成凝胶之前，快速浸湿小鸡羽毛，可能会造成失温现象的发生，且即使形成凝胶以后，水也会有部分分离出来，浸湿羽毛。若a组分水溶液包含增稠剂则a组分水溶液的粘稠性大大增加，该溶液滴落在小鸡羽毛上面时，浸湿小鸡羽毛的速度大大减少，导致在凝胶形成之前仅仅有少量的溶液浸湿小鸡羽毛，这样就避免了小鸡失温现象的发生，而且使形成的凝胶滴中包裹部分羽毛，不易脱落。特别是a组分水溶液具有触变性，则少量液体进入羽毛再形成凝胶，进一步提高了凝胶在羽毛上的粘附程度。
75.本发明的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物中，与二价或多价金属盐作用形成凝胶的凝胶剂包括但不局限于海藻酸盐和/或低酯果胶。为了进一步调节这种凝胶剂的水溶液(即b组分水溶液)的粘度、悬浮性等流变学性质，b组分还可包括使水的粘度增加从而改善其悬浮性能的增稠剂。这样的增稠剂包括但不局限于黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶、阿拉伯胶、桃胶、黄耆胶、刺梧桐胶、果胶、明胶、魔芋胶、纤维素胶(例如，羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素)。b组分水溶液在配制时使用纯水配制，这样可以不考虑二价或多价离子对其的影响。为了使用于形成凝胶的a组分和b组分在常温下通过低剪切搅拌即可获得良好流动性，a组分、b组分还可包括稀释剂(包括但不局限于无水葡萄糖、氯化钠、无水硫酸钠)和/或流动调节剂(包括但不局限于如气硅、沉淀二氧化硅、空心硅球)。为了使粘附在小鸡羽毛上的凝胶更能引起小鸡的注意a组分、b组分还可包括可食用色素。且速速的添加也有助于观察凝胶的过程。
76.在本发明的一个具体实施方式中，可溶性金属盐为钙盐，在水中与钙盐作用形成凝胶的凝胶剂为海藻酸钠。在本发明的另一个具体实施方式中，可溶性金属盐为钙盐，在水中与钙盐作用形成凝胶的凝胶剂为海藻酸钾。在本发明的一个具体实施方式中，可溶性金属盐为锌盐，在水中与锌盐作用形成凝胶的聚合物为海藻酸钠；在本发明的另一个具体实施方式中，可溶性金属盐为锌盐，在水中与锌盐作用形成凝胶的聚合物为海藻酸钾。在本发明的又一个具体实施方式中，可溶性金属盐为钙盐、锌盐混合物，在水中与钙盐、锌盐作用形成凝胶的凝胶剂为海藻酸钠和海藻酸钾的混合物。在本发明的又一个具体实施方式中，
可溶性金属盐为钙盐，在水中与钙盐作用形成凝胶的凝胶剂为低酯果胶。在本发明的一个具体实施方式中，果胶与钙离子的重量比例是40：1。
77.本发明的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物中，a组分和b组分是分别独立包装的，不能混合，否则会造成体系配制时的提早凝胶化而失去流动性，无法从装置中喷出。使用时分别将a组分和b组分溶解或分散到水中，获得各自的溶液。a组分、b组分各自都可以获得增稠、悬浮效果，遇水后发生水合作用，使水产生粘度、触变性能流变学特征。因此，优选a组分、b组分通过多孔隔膜(如可使用实用新型专利申请，申请号：202122759893.6所示的装置)缓慢倒入持续搅拌的水中(由于水合作用，一次大量在水中加入a组分、b组分，会形成“鱼眼”)，并持续搅拌，获得具有需要粘度和悬浮性的溶液，用于悬浮鸡球虫疫苗。鸡球虫疫苗可以在加入a组分和/或b组分前加入水中，也可以将a组分、b组分加入水后获得一定粘度后再加入，并搅拌均匀。a组分和b组分的水量可以根据实际进行调整，但是优选a组分用水、b组分用水量一致，因为a组分、b组分的量与水比较较少，因此进一步优选配制成a组分水溶液、b组分水溶液体积一致。加入a组分水溶液和/或b组分水溶液中鸡球虫疫苗的量可以根据实际情况进行调整，对于鸡球虫卵囊的加入可以单独加入到a组分水溶液中，也可以单独加入到b组分水溶液中，也可以按照不同比例分别加入到a组分水溶液和b组分水溶液中；在a组分水溶液中加入的比例和b组分水溶液的加入比例优选在1:3～3:1，进一步优选1:0.95～0.95:1，最优选在误差范围内为1:1；优选a组分水溶液、b组分水溶液的喷滴流速和量是可控制的；保证形成的凝胶中球虫卵囊的均匀性。
78.对于鸡球虫疫苗在上述料液中的总的加入量则可以根据免疫计划进行添加和调整。
79.a组分水溶液和b组分水溶液的配制过程中，一般在加入一种物料后持续搅拌一度时间，以获得整个体系相对均匀。a组分中的可溶性金属盐，特别是二价或多价可溶性金属盐的作用是与b组分结合形成凝胶，为了在配制过程a组分的水不会析出沾湿鸡的羽毛，需要在其中加入增稠剂。为了避免水中的钙离子等对a组分水溶液、b组分水溶液，特别是b组分水溶液的流动性产生影响，优选配置a组分水溶液、b组分水溶液，特别是b组分水溶液时使用硬度小于200ppm(以碳酸钙计，下同)的水，进一步优选使用硬度在小于50ppm的水，进一步优选使用纯水(硬度小于20ppm)。
80.在配制时，加入a组分、b组分时，要在水持续搅拌下加入，且一般加完a组分、b组分物料后优选持续搅拌一度时间，以获得a组分、b组分中的原料的充分水合，获得整个体系的相对均匀。
81.为了获得方便的使用效果，优选包含鸡球虫疫苗的a组分水溶液和b组分水溶液在接触之前具有较好的喷滴流动性，便于从各自的容器中喷滴，在从容器中喷滴之后接触过程中开始生成凝胶，并进一步滴落到小鸡羽毛上时原位生成凝胶，不易从小鸡羽毛上脱落，以便于啄食，获取免疫效果。
82.本发明的a组分水溶液和b组分水溶液的粘度均在10mpa.s-500mpa.s(1#转子，6rpm条件下测量)，进一步优选15mpa.s～250mpa.s；进一步优选25mpa.s～100mpa.s。
83.在本发明的一个具体实施方式中，a组分水溶液和b组分水溶液分别通过各自的管道送入相应的喷嘴中，为了便于在喷出后接触用于喷射a组分水溶液和b组分水溶液的喷嘴交替布置，每两个为一组，a喷嘴和b喷嘴间距为0.1～2mm，进一步优选为0.1～0.5mm。每组
喷组间的间距为0.5-10cm；这样，b组分水溶液和a组分水溶液从各自的喷嘴中喷出离开喷嘴后能够马上接触混合，能逐渐发生胶凝作用，并在滴落到小鸡羽毛上以后，未发生凝胶化的部分能稍进入羽毛，并进一步促进a组分水溶液、b组分水溶液的接触和混合，发生进一步的凝胶化，使得少量的羽毛被包裹进凝胶中，提高包裹了疫苗卵囊的凝胶胶滴在鸡羽毛上的粘附，但是又可以被小鸡方便的啄食。
84.这种凝胶化过程一方面与钙等离子的浓度有关，另一方面与从a组分水溶液与b组分接触到滴落到鸡的羽毛的时间有关。为了使a组分水溶液和b组分水溶液能在小鸡羽毛上原位形成凝胶，优选a组分水溶液和b组分水溶液的喷嘴距离小鸡平台的距离为10～50cm，进一步优选20-40cm。
85.通过调整a组分中的水溶性盐和b组分中形成凝胶的凝胶剂的比例，可改变b组分水溶液和a组分水溶液接触后形成凝胶的速度。本技术希望获得的效果是在两个组分的溶液从喷嘴中喷射出来之后，接触并开始发生凝胶化，在掉落至小鸡羽毛上时，仍有部分未凝胶化，可渗入羽毛，并进一步凝胶化作用，使得所形成的凝胶将一部分的羽毛裹入凝胶，获得对羽毛的最大粘附力，使其不会轻易的滑落，即使鸡的抖动也不会轻易的掉落，但是又可以被小鸡轻易的啄食。
86.本发明的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物形成的a组分水溶液和b组分水溶液的粘度分别为10mpa.s～500mpa.s，对于该粘度的溶液可以具有一定的悬浮鸡球虫卵囊的效果，且又因为喷滴免疫一般是使料液可以维持一直搅拌的状态，因此其对悬浮的要求一般可以比饮水免疫的低，因此对于粘度的要求也更低一些，对于饮水免疫一般在30mpa.s或以上基本可以维持其6h不太明显的沉降；而对于一直可以维持搅拌状态10mpa.s即可满足一般的要求。对于粘度过大是不利于喷出的，因此a组分水溶液和/或b组分水溶液的粘度不能过大，500mpas一般仍能维持流动的状态，可以喷出；进一步优选粘度在300mpa.s以下，进一步优选在150mpa.s以下。
87.对于形成的凝胶的粘度一般具有较大的粘度，这是因为有a、b组分中相互作用的结果。一般粘度为大于500mpa.s，进一步一般大于1000mpa.s。
88.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。具体实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施的，给出了详细的实施方式和操作过程。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行。除非另有说明，比例和百分数按重量计。
89.粘度测试，使用旋转粘度计(ndj-1型旋转式粘度计，上海越平科学仪器有限公司)进行各个转速下的粘度测试。
90.实施例1：
91.1.1鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的组成为：
92.a组分，其组成为：氯化钙8％，黄原胶8％(梅花牌，200目)，无水葡萄糖84％g(石药集团、65目)，共50g。
93.b组分，其组成为：海藻酸钠(青岛明月80目)48％，气硅(瓦克气相二氧化硅hdk n20)1％，黄原胶6.0％(梅花牌，200目)，无水葡萄糖45％(石药集团、65目)，共50g。
94.1.2使用方法：
95.(1)将a组分通过多孔板倒入持续搅拌的4l水中，继续搅拌，使黄原胶充分水合，得
稍浑浊的a组分水溶液，测量其粘度。
96.表1-1 a组分水溶液粘度
97.转速/rpm6123060粘度/mpa.s1351006545
98.(2)量取4l水，倒入鸡球虫卵囊疫苗50瓶(每瓶约5ml、每瓶1000羽份)，搅拌均匀，之后将b组分通过多孔隔膜加入到持续搅拌的上述含鸡球虫卵囊疫苗的水中，继续搅拌10分钟，得b组分水溶液，测量其粘度。
99.表1-2 b组分水溶液粘度
100.转速/rpm6123060粘度/mpa.s175160150135
101.该溶液的粘度(6rpm下)高于100mpa.s，根据检测结果结果可以满足6h悬浮要求。
102.(3)分别将少量a组分水溶液和b组分水溶液按照1:1充分混合后测试粘度。
103.表1-3 a+b组分水溶液粘度
104.转速/rpm6123060粘度/mpa.s583520410340
105.根据表1-3数据，可以看出，通过a+b的混合，因为海藻酸钠与钙离子作用产生一定的交联作用的作用，使得体系粘度增加，而且其粘度远远大于a组分水溶液的粘度、b组分水溶液的粘度以及a组分水溶液的粘度+b组分水溶液的粘度，表现出一定的凝胶化的作用。
106.(4)分别将a组分水溶液和b组分水溶液通过各自的管路从各自的喷嘴中同时喷滴，在离开喷嘴即开始接触，并滴到距离喷嘴距离20cm的平台上放置的小鸡羽毛上，在鸡羽毛上原位形成凝胶并粘附在小鸡羽毛上。实际使用效果图如图3所示。
107.从图3照片可以看出，小鸡羽毛上的已经原位形成了凝胶胶滴，使得凝胶滴不易从羽毛上滑落，而小鸡羽毛上的凝胶滴可被其它小鸡迅速啄食，可以起到很好的经口免疫的效果。左边照片是刚滴完胶滴的小鸡的照片，可以看到在小鸡身上和头上都有凝胶滴，其形状有些不太规则，这与两滴合并成的胶滴相关，右边是大约3分钟后小鸡羽毛上的照片，身上的胶滴基本没有明显的变化，说明在身上的胶滴有较好的粘附性，没有明显的滑落；而且没有明显的羽毛被打湿的情况；对于小鸡的头部，右边照片比左边的少，这是因为小鸡头部抖动较厉害，部分胶滴还是会有部分滑落。对于小鸡的啄食，三分钟时间基本已经可以完成大部分的啄食，所以上述原位生成的胶滴对于小鸡的啄食获得免疫是非常有小的。而且从右侧小鸡的羽毛可以看到三分钟后小鸡羽毛的浸湿情况没有明显差别，说明这种在小鸡羽毛上原位生成的胶滴不易浸湿小鸡的羽毛，对于减少小鸡的失温、应激具有较好的效果。
108.对比实施例a1
109.a1.1鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的组成为：
110.a组分，其组成为：氯化钙8％，无水葡萄糖92％。
111.b组分，其组成为：海藻酸钠(青岛明月80目)48％，气硅(瓦克气相二氧化硅hdk n20)1％，黄原胶6％(梅花牌，200目)，无水葡萄糖45％(石药集团、65目)，共50g。
112.a1.2使用方法：
113.(1)将a组分倒入搅拌的4l水中，搅拌，溶解得澄清a组分水溶液；
114.(2)量取4l水，倒入鸡球虫卵囊疫苗50瓶(每瓶约5ml、每瓶1000羽份)，搅拌均匀，之后将b组分通过多孔隔膜加入到持续搅拌的上述含鸡球虫卵囊疫苗的水中，继续搅拌10分钟，得b组分水溶液；
115.(3)分别将a组分水溶液和b组分水溶液通过各自的管路从各自的喷嘴中同时喷滴，在离开喷嘴即开始接触，并在滴到距离距喷嘴20cm的平台上放置的小鸡羽毛上之前，形成凝胶，然后粘附在小鸡羽毛上。
116.因为a溶液的粘度较小，与b组分水溶液凝胶化速度较快，掉落到羽毛上时，凝胶多已经形成，凝胶并不太容易在羽毛上粘附；另一方面a组分的水成分较多，且粘度较低，因此较容易浸湿羽毛；造成小鸡羽毛较多的浸湿，对于小鸡会有较明显的失温现象而产生应激，会影响小鸡的啄食。
117.对比实施例2：
118.a2.1参照实施例1的a组分的组成、b组分的组成即配制方法。
119.按照实施例1使用方法的(3)的方法将a、b混合后再从单独喷嘴滴出。
120.结果显示，因为具有较大的粘度，胶滴不太容易喷出，最终影响小鸡的啄食。
121.实施例2：
122.2.1鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的组成为：
123.a组分，其组成为：氯化钙10％，黄原胶8％(梅花牌，200目)，3％瓜尔胶(shree ram gum chemicalspvt.ltd，200目)，无水葡萄糖79％(石药集团、65目)。
124.b组分，其组成为：海藻酸钾(青岛明月80目)50％，气硅(瓦克气相二氧化硅hdk n20)2％，亮蓝(上海染料研究所，狮头牌)0.2％、瓜尔胶15％，无水葡萄糖32.8％(石药集团、65目)，共50g。
125.2.2使用方法：
126.(1)取4l水，加入鸡球虫卵囊疫苗25瓶(每瓶约5ml、每瓶1000羽份)，充分搅拌，将a组分通过多孔板倒入持续搅拌的上述包含疫苗的4l水中，搅拌，充分水合得粘稠溶液；
127.(2)量取4l水，倒入鸡球虫卵囊疫苗25瓶，搅拌均匀，之后将b组分通过多孔隔膜加入到持续搅拌的上述倒入含鸡球虫卵囊疫苗的水中，继续搅拌10分钟，得b组分水溶液。
128.(3)分别将a组分水溶液和b组分水溶液通过各自的管路从各自的多个喷嘴中同时喷出，在离开喷嘴即开始接触，并滴到距喷嘴15cm的平台上放置的小鸡羽毛上，在小鸡羽毛上原位形成凝胶并粘附在小鸡羽毛上。实际使用效果图类似图3。
129.在该实施例中，a组分配制的溶液的粘度较实施例更大，6rpm下约为200mpa.s，但是该液体具有较大的触变系数，因此仍能够较容易的喷出，并与b组分喷出的液滴接触后混合成胶。b组分虽然海藻酸钠较实施例1多，但是将瓜尔胶替换了黄原胶，整体的粘度较实施例1的b组分水溶液的粘度稍低。6rpm下约为150mpa.s；但是因为体系中含有更多的钙的成分，成胶应该更快，但同时组分a溶液的粘度更大，阻碍了钙离子的移动，且小鸡离喷嘴更近，因此在小鸡羽毛上仍能够成胶，部分成胶的胶滴包裹少量鸡毛，提高了胶滴在羽毛上的粘附。
130.实施例3：
131.3.1鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的组成为：
132.a组分，其组成为：氯化钙6％，葡萄糖酸锌6％，黄原胶2％(梅花牌，200目)，瓜尔胶
20％(shree ram gum chemicalspvt.ltd，200目)，无水葡萄糖66％(石药集团、65目)。共50g。
133.b组分，其组成为：低酯果胶(意大利施华，80目)30％，气硅(瓦克气相二氧化硅hdk n20)1％，黄原胶(梅花牌，200目)8％，无水葡萄糖61％(石药集团、65目)。共50g。
134.3.2使用方法：
135.(1)将a组分通过多孔板倒入持续搅拌的4l水中，继续搅拌，溶解得充分水合的a组分水溶液，倒入鸡球虫卵囊疫苗25瓶(每瓶约5ml、每瓶1000羽份)，继续搅拌混合均匀；
136.(2)量取4l水，倒入鸡球虫卵囊疫苗25瓶，搅拌均匀，之后将b组分通过多孔隔膜加入到持续搅拌的上述倒入含鸡球虫卵囊疫苗的水中，继续搅拌，得b组分水溶液。
137.(3)分别将a组分水溶液和b组分水溶液通过各种的管路从各自的多个喷嘴中同时喷出，在到达距喷嘴25cm的平台上放置的小鸡羽毛上之前或之后在小鸡羽毛上原位形成凝胶并粘附在小鸡羽毛上。实际使用效果图类似图3。
138.以上所述的仅为本发明的较佳实施例，并非用以限定本发明的范围，本发明的上述实施例还可以做出各种变化。即凡是依据本发明申请的权利要求书及说明书内容所作的简单、等效变化与修饰，皆落入本发明专利的权利要求保护范围。本发明未详尽描述的均为常规技术内容。

技术特征：
1.一种鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述载体组合物包括以下组分：a组分，其包括可溶性金属盐和不与所述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂，所述可溶性金属盐为二价或多价金属盐，b组分，其包括在水中与所述a组分中的所述可溶性金属盐作用形成凝胶的凝胶剂，其中所述a组分中的所述可溶性金属盐和所述b组分中的所述凝胶剂的质量比为10:1～1:100，其中所述a组分的水溶液与所述b组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。2.根据权利要求1所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述b组分中的凝胶剂在没有所述可溶性金属盐的情况下可以使水增稠。3.根据权利要求1或2所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，用于形成凝胶的凝胶剂选自海藻酸盐和/或低酯果胶。4.根据权利要求3所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述海藻酸盐选自藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸铵和海藻酸镁中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，a组分中不与所述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂选自黄原胶、瓜尔胶、阿拉伯胶、魔芋胶和桃胶中的一种或多种。6.根据权利要求1所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述b组分还包括增稠剂，用于使水增稠，进一步地，所述增稠剂选自黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶、阿拉伯胶、桃胶、黄耆胶、刺梧桐胶、果胶、明胶、魔芋胶、纤维素胶或其衍生物中的一种或多种。7.根据权利要求1所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述a组分和所述b组分还分别包括稀释剂、流动调节剂和可食用色素中的一种或多种。8.根据权利要求7所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述稀释剂选自葡萄糖、氯化钠、无水硫酸钠中的一种或多种；所述流动调节剂选自气相二氧化硅、沉淀二氧化硅和空心硅球中的一种或多种。9.根据权利要求1所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物，其特征在于，所述二价金属盐选自钙盐、锌盐；所述多价盐选自铁盐、铝盐；进一步地，所述钙盐选自氯化钙、硝酸钙、葡萄糖酸钙、溴化钙、碘化钙、磷酸二氢钙、碳酸氢钙、硫酸氢钙、硫酸钙、亚硫酸氢钙、次氯酸钙、氯酸钙、高氯酸钙中的一种或多种的混合物，进一步地，所述锌盐选自氯化锌、硫酸锌、硝酸锌、葡萄糖酸锌中的一种或多种的混合物，进一步地，所述铁盐选自氯化铁、硫酸铁、硝酸铁中的一种或多种的混合物，进一步地，所述铝盐选自氯化铝、硫酸铝、硝酸铝中的一种或多种的混合物。10.权利要求1-9任一项所述的鸡球虫喷滴免疫用载体组合物的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步骤：(1)将a组分溶解到水中，得到有粘性的a组分水溶液；(2)将b组分溶解到水中，得到有粘性的b组分水溶液；
(3)将鸡球虫疫苗加入a组分水溶液和/或b组分水溶液中，得到包含鸡球虫疫苗的a组分水溶液和/或b组分水溶液，或者将鸡球虫疫苗加入到用于配制a组分水溶液和/或b组分水溶液的水中，然后向其中分别加入相应的a组分或b组分，得到包含鸡球虫疫苗的a组分水溶液和/或b组分水溶液；以及(4)将步骤(3)得到的最终的a组分水溶液和b组分水溶液分别依次或同时向小鸡喷滴，两种溶液在喷出后混合，并在鸡的羽毛上原位形成凝胶，粘附在小鸡羽毛上，供小鸡啄食，获得对鸡球虫的免疫。11.一种鸡球虫喷滴免疫组合物，其特征在于，所述组合物包括以下组分：a组分，其包括可溶性金属盐和不与所述可溶性盐作用生成凝胶的增稠剂，其中所述可溶性金属盐为二价或多价金属盐，b组分，其包括在水中与a组分中所述可溶性金属盐作用形成凝胶的凝胶剂，和鸡球虫疫苗，其中所述可溶性金属盐和所述凝胶剂的质量比为10:1～1:100，其中所述a组分的水溶液与所述b组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。

技术总结
本发明提供了鸡球虫喷滴免疫用载体组合物及使用方法和鸡球虫喷滴免疫组合物，该鸡球虫喷滴免疫用载体组合物包括A组分，其包括可溶性金属盐和不与上述可溶性金属盐作用形成凝胶的增稠剂，该可溶性金属盐为二价或多价金属盐，和B组分，其包括在水中与A组分中可溶性金属盐作用形成凝胶的凝胶剂，其中可溶性金属盐和用于形成凝胶的凝胶剂的质量比为10:1～1:100，其中A组分的水溶液与B组分的水溶液接触形成凝胶，所述凝胶可包裹鸡球虫疫苗并粘附在小鸡羽毛上供小鸡啄食获得对鸡球虫免疫效果。该载体组合物使得鸡球虫疫苗的利用率高，活性保持时间长。活性保持时间长。活性保持时间长。


技术研发人员：刘肖娟 王振兴 赵一阳 翁亚彪 谭志坚 刘丽丹 曾莉
受保护的技术使用者：佛山市正典生物技术有限公司
技术研发日：2021.12.28
技术公布日：2022/3/8