超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法及用途

1.本发明涉及精油提取技术领域，特别涉及到一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法及抑制金黄色葡萄球菌的应用。


背景技术：

2.柑橘类水果是我国南方地区产量最大、分布最广的亚热带水果，其口感甘甜饱满，营养物质丰富，富含多种维生素与微量元素，且清新怡人的香气，明亮的色泽深受广大消费者的喜爱。柑橘成分的药理活性和生理活性、低毒性和经济可行性，引起了学术界对植物研究的极大热情。近年来对于柑橘的加工及副产物的深利用日益增加，柑橘及其副产物对保护心脏、预防心脑血管疾病、抗炎症、抗肿瘤及癌症有着一定的功效。
3.皇帝柑属柑桔类植物，又名贡柑，属于热带、亚热带水果，它是柑橘与橙的杂交品种，营养丰富，富含多种维生素、微量元素、矿物质、有机酸等。皇帝柑精油是果皮油囊或油腺中大量存在的芳香化合物，主要分布于果皮的外皮，可溶于醇、醚和天然油，但不溶于水。柑橘精油大约400个化合物的复杂混合物，具体含量和组成取决于柑橘的品种。从皇帝柑果皮中提取的精油，它不溶于水，且具有芳香气味。柑橘皮精油具有促进胃肠道消化、止咳化痰、溶解胆结石、消炎抑菌以及抗氧化等作用，不仅可以作为饮料、糕果类食品的调味剂，还可以用作香水、清洁剂等日用品的香味剂，既天然环保又节省成本。


技术实现要素：

4.本发明要解决的技术问题是提出一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法及其在抑制金黄色葡萄球菌中的应用。
5.为了解决上述技术问题，本发明一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，包括以下步骤：
6.步骤1：将皇帝柑柑橘皮制备成皇帝柑柑橘粉末；
7.步骤2：向皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水以及质量浓度为1～2％的nacl水溶液；于40～50℃保温搅拌20～30min，再加入沸石，冰浴超声波辅助处理15～20min，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物(为悬浊液)；
8.所述皇帝柑柑橘粉末：蒸馏水＝1:18～22的质量比；
9.皇帝柑橘皮粉末、nacl水溶液和沸石的用量为：(10～20)g:(200～400)ml:(1～3)g；
10.步骤3：将步骤2获得的皇帝柑粉末浸提混合物，于200～220℃水蒸气蒸馏2～3h，收集100
±
0.5℃馏分，得到皇帝柑柑橘精油。
11.作为本发明的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法的改进：
12.步骤2中：超声功率为400～500w。
13.作为本发明的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法的进一步改进：
14.步骤1为：皇帝柑柑橘皮(新鲜的皇帝柑剥皮所得)用0.05％cacl2水溶液清洗，阴
干后粉碎(过40～80目筛)，得到皇帝柑柑橘粉末。
15.作为本发明的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法的进一步改进：
16.步骤1中的粉碎为粉碎至过60目筛(用粉碎机粉碎)。
17.作为本发明的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法的进一步改进：
18.步骤2为：向皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水以及质量浓度为1.5％的nacl水溶液；保温于45℃磁力搅拌25min，再加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为450w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物(为悬浊液)；
19.所述皇帝柑柑橘粉末：蒸馏水＝1：20的质量比；
20.皇帝柑橘皮粉末、nacl水溶液和沸石的用量为：(10～20)g:(200～400)ml:(1～3)g。
21.作为本发明的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法的进一步改进：
22.步骤3：水蒸气蒸馏温度为220℃，水蒸气蒸馏时间为2h。
23.本发明还同时提供了上述方法制备而得的皇帝柑精油的用途：抑制金黄色葡萄球菌。
24.本发明与传统的水蒸气蒸馏法提取皇帝柑柑橘精油相比，本发明所得到超声辅助微切助剂提取皇帝柑柑橘精油的提取率、提取效率显著提高。
25.本发明以金黄色葡萄球菌为指示菌，验证了皇帝柑精油具有相对较高体外抑菌效果。
26.在本发明中，加入沸石后冰浴超声波辅助处理是为了防止爆沸，因为高温会导致精油热敏性分解或者氧化。
27.本发明的技术优势是：
28.1.本发明提出的一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，在该提取条件下，水蒸气蒸馏2h时皇帝柑柑橘精油的提取率为8.92％，而传统的水蒸气蒸馏法皇帝柑柑橘精油提取率3h时为4.46％，经过gc-ms气相色谱-质谱联用技术分析，对皇帝柑柑橘精油的主要化学成分和相对含量的测定表明皇帝柑柑橘精油的主要成分在5～60min之间(图8)。
29.2.皇帝柑柑橘精油对金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌作用，其最小抑菌浓度mic为4mg/ml、最小杀菌浓度mbc为8mg/ml。
30.综上在不同的提取工艺下植物精油的化学活性成分差别较大，皇帝柑柑橘精油研究开发的关键则在于对比不同提取工艺条件的考察和优化，通过优化皇帝柑柑橘精油的提取工艺，为皇帝柑柑橘精油在外用天然抑菌产品的深度开发等方面的应用提供重要的理论依据和技术基础。
附图说明
31.下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
32.图1本发明实施不同粒径大小对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
33.图2本发明实施不同料液比对对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
34.图3本发明实施不同超声功率对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
35.图4本发明实施不同超声时间对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
36.图5本发明实施不同蒸馏温度对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
37.图6本发明实施不同蒸馏时间对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
38.图7本发明实施不同nacl浓度对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
39.图8为水蒸气蒸馏法与超声辅助微切助剂不同蒸馏时间对皇帝柑柑橘精油提取率影响的试验结果图；
40.图9本发明实施优化后皇帝柑柑橘精油的gc-ms总离子流出图。
具体实施方式
41.下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，对本发明做进一步的说明。
42.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
43.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
44.将新鲜的皇帝柑剥皮所得的皇帝柑柑橘皮用0.05％cacl2水溶液清洗，阴干；作为清洗阴干后皇帝柑柑橘皮；皇帝柑柑橘皮与0.05％cacl2水溶液的用量比为：1kg/6～8l；所述阴干为阴凉处自然干燥至恒重，时间约为72h左右。
45.超声波频率为常规的20khz。
46.皇帝柑柑橘精油提取率(％)＝精油体积(g)/皇帝柑柑橘粉末质量(g)
×
100％。
47.实施例1、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
48.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过40目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
49.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入20倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为3％的nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为450w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
50.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:200ml:3g。
51.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在220℃下水蒸气蒸馏2h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.782g。
52.实施例2、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
53.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后，过60目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
54.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入18倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为1％的nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理20min，超声功率为500w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
55.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:180ml:3g。
56.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在200℃下水蒸气蒸馏3h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.825g。
57.实施例3、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
58.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过80目筛，得到皇帝柑柑橘
粉末；
59.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入18倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为的2％nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理20min，超声功率为400w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
60.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:180ml:2g。
61.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在200℃下水蒸气蒸馏2h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.838g。
62.实施例4、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
63.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过60目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
64.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入20倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为2％的nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为450w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
65.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:200ml:3g。
66.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在220℃下水蒸气蒸馏2h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.746g。
67.实施例5、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
68.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过60目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
69.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入20倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为1.5％的nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为450w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
70.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:200ml:2g。
71.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在220℃下水蒸气蒸馏2h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.892g。
72.实施例6、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
73.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过40目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
74.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入22倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为3％的nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为400w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
75.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:220ml:2g。
76.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在240℃下水蒸气蒸馏1h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.724g。
77.实施例7、一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，依次进行如下步骤：
78.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过80目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
79.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入22倍质量的蒸馏水，加入质量浓度为的1％nacl溶液加热至40～50℃保温25min，加入沸石，冰浴超声波辅助处理25min，超声功率为500w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物。
80.皇帝柑柑橘粉末、nacl溶液和沸石的料液比为：10g:220ml:3g。
81.(3)将步骤(2)制备所得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在180℃下水蒸气蒸馏1h，收集100℃馏分，制得皇帝柑精油0.738g。
82.本发明在发明过程中，为了充分考虑不同因素的提取条件对皇帝柑柑橘精油提取率的影响，因此进行了如下实验：
83.设定皇帝柑柑橘粉末10g，质量浓度1.5％nacl水溶液，皇帝柑橘皮粉末、nacl水溶液和沸石的用量为10g:200ml:2g；
84.(1)试验设计：
85.①
不同粉碎度：取清洗阴干后皇帝柑柑橘皮，剪切破碎后，分别粉碎过20、40、60、80、100目的筛子，获得不同粒径大小的样品。分别称取不同大小的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，于220℃下水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳粒径大小。
86.②
不同料液比：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，分别加入16、18、20、22、24、26倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，220℃水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳料液比。
87.③
不同超声功率：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，超声功率分别为350w、400w、450w、500w、550w，220℃水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳超声功率。
88.④
不同超声时间：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，超声功率450w，超声时间5min、10min、15min、20min、25min、30min，220℃水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳超声时间。
89.⑤
不同蒸馏温度：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，超声功率450w，超声时间15min，分别于180℃、200℃、220℃、240℃、260℃，220℃的蒸馏温度下水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳蒸馏温度。
90.⑥
不同蒸馏时间：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，1.5％浓度nacl浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，超声功率450w，超声时间15min，220℃蒸馏温度下水蒸气蒸馏1h、2h、3h、4h、5h，6h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳蒸馏时间。
91.⑦
不同nacl浓度：分别称取过60目筛的皇帝柑柑橘粉末10g，加入20倍量蒸馏水，
分别于nacl浓度0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％浸泡，再加入沸石冰浴超声波辅助处理，超声功率450w，超声时间15min，蒸馏温度220℃水蒸气蒸馏2h，每个重复3次试验，收集并测量精油重量，计算提取率，从而筛选出提取的最佳nacl浓度。
92.上述
①
～
⑦
的皇帝柑柑橘精油提取率结果如图1～7所示。
93.如图1所示，当柑橘粒径颗粒从60目降低到100目时，皇帝柑柑橘精油的提取率急剧下降，可能是因为柑橘粉末粒径太小在组织破碎过程中大部分挥发性物质流失；
94.如图2所示，当料液比在20倍时，皇帝柑柑橘精油的提取率高；
95.如图3所示，当超声功率大于450w时，皇帝柑精油的提取率趋于降低，这可能是因为超声破碎的空化作用将柑橘皮充分破碎，同时空化作用导致局部温度增加，部分挥发性物质逸出；
96.如图4所示，随着超声时间延长，皇帝柑柑橘精油的提取率急剧下降，这可能是因为超时间的空化作用导致温度急剧升高，挥发性物质逸出；
97.如图5所示，当蒸馏温度220℃以后，皇帝柑精油提取率逐渐降低，这可能是因为高温导致热敏性的精油成分发生氧化，导致提取率降低；
98.如图6所示，当蒸馏时间2h以后，皇帝柑精油提取率也呈现缓慢增加的情况。
99.如图7所示，随着nacl浓度从1.5％增加到2.5％，皇帝柑柑橘精油的提取率呈现下降的趋势，这可能是因为nacl水化作用导致精油黏附在柑橘皮表层所导致。
100.从图1～图7中可以看出，不同的破碎粒径大小、料液比、超声功率、超声时间、蒸馏温度、蒸馏时间、nacl浓度对皇帝柑柑橘精油提取率都具有显著性影响。
101.对比例1：水蒸气蒸馏法，包括如下步骤：
102.(1)将清洗阴干后皇帝柑柑橘皮经组织破碎机处理后过60目筛，得到皇帝柑柑橘粉末；
103.(2)向10g皇帝柑柑橘粉末中加入20倍质量的蒸馏水40～50℃浸提1h，得到皇帝柑柑橘粉末浸提混合物(悬浊液)；
104.(3)将步骤(2)获得的皇帝柑柑橘粉末浸提混合物，在220℃下水蒸气蒸馏不同的时间(具体如图8所述)，收集100℃馏分，得到皇帝柑柑橘精油。
105.蒸馏时间与皇帝柑柑橘精油提取率的对应关系如图8的“水蒸气蒸馏法”所述。
106.本发明的蒸馏时间与皇帝柑柑橘精油提取率的对应关系如图8的“超声辅助微切助剂法”所述。
107.如图8所示，常规水蒸气蒸馏法与超声辅助微切助剂法随着提取时间增加呈现增加的趋势，随着提取时间的延长，皇帝柑精油提取率先急速增加后缓慢增加，超声辅助微切助剂法提取率显著高于常规水蒸气蒸馏法。
108.从图8可以看出，超声辅助微切助剂法提取皇帝柑精油提取率显著高于常规水蒸气蒸馏法。
109.采用gc-ms对本发明所得的皇帝柑柑橘精油的组成成分和相对含量的测定结果如图9所示。图9中的a～e，代表皇帝柑柑橘精油中主要的5种成分；α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、柠檬烯、芳樟醇。
110.依据上述实施例1～7的皇帝柑柑橘精油的提取方法所制备的皇帝柑柑橘精油对金黄色葡萄球菌进行抑菌试验。
111.(1)供试菌菌株：金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus atcc43300)购于北京生物保藏中心。
112.(2)测定抑菌圈：采用滤纸片琼脂平板扩散法，用移液枪移取20μl皇帝柑柑橘精油滴于灭菌滤纸(d＝6mm)上，待滤纸片充分吸收后轻放在已经涂布金黄色葡萄球菌的培养基平板(菌液浓度107cfu/ml，100μl)上，每组设3次重复，选用无菌水作为阴性对照，链霉素作为阳性对照(浓度5μg/ml)，置于37℃恒温培养箱中培养24h。观察并记录抑菌圈的有无及直径大小作为判定抑菌作用大小的标准，采用十字交叉法测量抑菌圈直径大小，取平均值作为测定结果。抑菌圈直径＞20mm为极敏感、抑菌圈直径15～20mm之间为高敏感，抑菌圈直径10～15mm之间为中敏感，抑菌圈直径＜10mm为低敏感。
113.(3)用接种环挑取形态相似金黄色葡萄球菌3-5个，接种于4-5ml的tsb肉汤中，37℃孵育2-6h。增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或tsb肉汤培养基校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1～2
×
108cfu/ml。用tsb肉汤将上述菌悬液进行1∶100稀释后备用。注意应在15分钟内接种完配制好的接种物，并取一份接种物在非选择性琼脂平板上传代培养，以检查接种物纯度。
114.取无菌试管(13
×
100mm)13支，排成一排，除第1管加入1.6ml tsb肉汤外，其余每管加入tsb肉汤1ml，在第1管加入皇帝柑柑橘精油0.4ml混匀，然后吸取1ml至第2管，混匀后再吸取1ml至第3管，如此连续倍比稀释至第11管，并从第11管中吸取1ml弃去，第12管为不含药物的生长对照，第13管为阳性对照。此时各管药物浓度依次为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25mg/ml。然后在每管内加入上述制备好的接种物各1ml，使每管最终菌液浓度约为5
×
105cfu/ml。第1管至第11管药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。
115.(4)最低抑菌浓度(mic)：用10ml的试管采用二倍稀释法进行mic试验，按(3)操作充分混匀，每个重复三次，置于恒温培养箱37℃培养24h，观察试管是否浑浊，以没有浑浊的管开始记为皇帝柑精油对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(mic)。
116.(5)最小杀菌浓度(mbc)的测定：采用琼脂培养基平板法，取(4)中的各样品mic值所对应的溶液均匀涂布于tsa培养基中，倒置培养于恒温培养箱37℃中培养24h。观察培养基上是否有金黄色葡萄球菌生长，没有生长菌落的平板记录为最低杀菌浓度(mbc)。
117.测定结果如下：
118.表1
[0119][0120]
由上表1可知，根据本发明的皇帝柑柑橘精油的提取方法获得的皇帝柑柑橘精油对金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌作用，其mic和mbc均在16mg/ml以下。其中实施例5中所得皇帝柑柑橘精油的抑菌效果最佳。本发明通过超声波辅助浸提与水蒸气蒸馏法相结合提取皇帝柑柑橘精油，不仅有效缩短了精油的提取时间，提高效率，同时可以显著提高了皇帝柑柑橘精油对金换色葡萄球菌的抑菌活性。
[0121]
根据本发明实施例1～7的皇帝柑柑橘精油提取率变化，钠盐离子微切助剂和超声波辅助水蒸气蒸馏法相结合，有利于提高皇帝柑柑橘精油的提取率。
[0122]
对比例2、取消实施例5步骤2)的“加入沸石”，也相应取消“冰浴超声波辅助处理”，其余等同于实施例5。
[0123]
对比例3、仅仅取消实施例5步骤2)的“加入沸石”，即保温25min后直接进行冰浴超声波辅助处理，其余等同于实施例5。
[0124]
对比例4、仅仅取消实施例5步骤2)的“加入nacl溶液”，即，皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水后直接加热至40～50℃保温25min，而后加入沸石冰浴超声波辅助处理，其余等同于实施例5。
[0125]
对比例5-1、将“2％的nacl水溶液”改成“2％的kcl水溶液”，其余等同于实施例5。
[0126]
对比例5-2、将“2％的nacl水溶液”改成“2％的cacl2水溶液”，其余等同于实施例5。
[0127]
对比例5-3、将“2％的nacl溶液”改成“2％的na2co3水溶液”，其余等同于实施例5。
[0128]
将上述对比例所得产物进行如上的抑菌试验，所得结果如下表2所述。
[0129]
表2
[0130][0131]
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

技术特征：
1.超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1：将皇帝柑柑橘皮制备成皇帝柑柑橘粉末；步骤2：向皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水以及质量浓度为1～2％的nacl水溶液；于40～50℃保温搅拌20～30min，再加入沸石，冰浴超声波辅助处理15～20min，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物；所述皇帝柑柑橘粉末：蒸馏水＝1：18～22的质量比；皇帝柑橘皮粉末、nacl水溶液和沸石的用量为：(10～20)g:(200～400)ml:(1～3)g；步骤3：将步骤2获得的皇帝柑粉末浸提混合物，于200～220℃水蒸气蒸馏2～3h，收集100
±
0.5℃馏分，得到皇帝柑柑橘精油。2.根据权利要求1所述的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于：步骤2中：超声功率为400～500w。3.根据权利要求1或2所述的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于：步骤1为：皇帝柑柑橘皮用0.05％cacl2水溶液清洗，阴干后粉碎，得到皇帝柑柑橘粉末。4.根据权利要求3所述的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于：步骤1中的粉碎为粉碎至过60目筛。5.根据权利要求4所述的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于：步骤2为：向皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水以及质量浓度为1.5％的nacl水溶液；保温于45℃磁力搅拌25min，再加入沸石，冰浴超声波辅助处理15min，超声功率为450w，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物；所述皇帝柑柑橘粉末：蒸馏水＝1：20的质量比；皇帝柑橘皮粉末、nacl水溶液和沸石的用量为：(10～20)g:(200～400)ml:(1～3)g。6.根据权利要求5所述的超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，其特征在于：步骤3：水蒸气蒸馏温度为220℃，水蒸气蒸馏时间为2h。7.如权利要求1～6任一方法制备而得的皇帝柑精油的用途：抑制金黄色葡萄球菌。

技术总结
本发明公开了一种超声辅助微切助剂提高皇帝柑精油提取率的方法，包括以下步骤：向皇帝柑柑橘粉末中加入蒸馏水以及质量浓度为1～2％的NaCl水溶液；于40～50℃保温搅拌20～30min，再加入沸石，冰浴超声波辅助处理15～20min，得到皇帝柑橘皮粉末浸提混合物；将皇帝柑粉末浸提混合物水蒸气蒸馏，收集馏分，得到皇帝柑柑橘精油。该皇帝柑柑橘精油对金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌作用。萄球菌具有一定的抑菌作用。萄球菌具有一定的抑菌作用。


技术研发人员：顾青 李国强 郦萍 周青青 周涛
受保护的技术使用者：浙江工商大学
技术研发日：2021.12.14
技术公布日：2022/3/8