一种透明质酸钠精华液及其制备方法与流程

1.本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及一种透明质酸钠精华液及其制备方法。


背景技术：

2.透明质酸，俗称玻尿酸，是一种高分子量线性大分子酸性黏多糖，由d-葡萄糖醛酸和n-乙酰基氨基-d-葡萄糖的双塘单位重复交替连接组成。拥有更加便利的环境天然透明质酸广泛存在于高等动物体内各种组织中，主要分布在细胞基质和润滑液中，包括人脐带、关节滑液、皮肤、胸淋巴液、玻璃体、鸡冠等。ha分子的特定构型，使其具有较高的吸水性、黏度和保湿作用，在人体中起到结构支持和保湿的作用，它为细胞以及ecm成分(包括胶原蛋白和弹性蛋白)提供润滑与减震作用，还可以调节组织中的水平衡，使细胞迁移和增殖，透明质酸具有极强的保水作用，保湿效果高于目前自然界发现的其他保湿物质，被誉为理想的天然保湿因子，已被广泛应用于临床医学和化妆品生产等领域。
3.透明质酸以透明质酸盐的形式存在，即透明质酸钠。透明质酸的生理功能主要与其分子量大小有关，存在于不同部位不同分子量大小不同，生理功能也不尽相同。而其保湿性也与分子量大小相关，分子量越大，则保湿性能也越强，并且保湿性能不受环境中相对湿度影响。除了保湿作用外，化妆品中的透明质酸还可补充皮肤中的内源性透明质酸，利于营养物质的传输和代谢废物排出。透明质酸能减少大量紫外线的透过，并且在皮肤被紫外线照射产生超氧自由基后，起到清除氧自由基的作用，因此还可用于防晒与抗衰老。同时，透明质酸良好的亲水性、可塑性、可逆性、可生物降解性和生物相容性等特点。
4.精华液是护肤品之中对肌肤改善效果最好的一种，其中具有多种改善肌肤的有效成分，同时可以增加肌肤的水合度，加快肌肤对精华液中有效成分的吸收，补充肌肤所需要的养分和水分，对肌肤的美白、保湿、抗皱、紧肤、营养等都有着改善效果。
5.透明质酸钠精华液是以透明质酸钠为主要成分的护肤品，起到补水保湿的作用，但是现在市面上的透明质酸钠精华液由于透明质酸钠容易被人体内存在的透明质酸酶降解、在水体系中缺乏力学强度，在体内无法做到长时间保存，无法在角质层中储留发挥作用，皮肤的吸收效果不佳导致其营养成分无法停留在真皮中，导致其性能大大减弱。
6.专利cn 109223618 a提供了一种透明质酸精华液及其制备方法，包括以下重量百分比的组分：透明质酸钠0.01％-3.0％、水解透明质酸钠0.01％-1.0％、乙酰化透明质酸钠0.01％-1.0％、透明质酸钠交联聚合物0.1％-10％、保湿剂0.1％-15.0％、舒缓修复剂0.1％-5％、稳定剂0.1％-5％，余量为纯化水。该精华液可有效解决现有的精华液存在的价格贵，保湿时间短的问题。但是该透明质酸精华液存在吸收不好、保湿效果一般的问题。


技术实现要素：

7.有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是：(1)对透明质酸钠进行改性，改善其容易被透明质酸酶降解的问题；(2)制备一种保湿效果好的透明质酸钠精华液。
8.为实现上述目的，本发明提供了一种透明质酸钠精华液及其制备方法。
9.为了实现上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：
10.一种透明质酸钠精华液，包括如下重量份的组分：4-8份改性透明质酸钠、0.5-0.8份角鲨烷、0.5-1.0份蜂胶、40-50份保湿剂、5-10份皮肤调理剂、3-5份中药精华提取物、0.1-0.5份吸收促进剂、50-80份水。
11.所述改性透明质酸钠是质量比为1:2-3的丁酰化透明质酸钠和三氟乙酰化透明质酸钠的混合。
12.所述改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：
13.1)脱乙酰化透明质酸钠的制备：称取5.0-10.0g透明质酸钠、2.5-5.0g硫酸肼与100-150ml一水合肼中，搅拌24-48h至完全溶解得体系1，将体系1加热至60-80℃保温0.5-1小时，加入200-300ml70-90wt％乙醇水溶液，出现白色絮状沉淀，过滤，收集滤饼，将滤饼置于40-60℃干燥箱中干燥6-8h后，将滤饼加入20-30ml 3-6wt％的乙酸水溶液和0.5-1mol/l的碘酸水溶液的混合液中得体系2，体系2在0-5℃下反应1-2h后加入3-5wt％的碘甲烷水溶液得体系3，体系3在20-40℃下反应10-30min后用80-99wt％乙醚水溶液萃取2-3次，收集水层，向水层中加入0.5-1mol/l的氢氧化钠水溶液调节ph值至7-7.5得体系4，向体系4中加入200-300ml 70-90wt％乙醇水溶液，有白色絮状沉淀析出，过滤收集滤饼，将滤饼按料液比1:10-20g/ml溶解在水中，用10kda-14kda的透析袋透析48-72h，完毕后离心，取上层清液-15～-25℃冷冻干燥冻干12-24h后得脱乙酰化透明质酸钠；
14.2)丁酰化透明质酸钠的制备：称取0.1-0.5g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50-80ml水中，加入10-12ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入10-12ml丁酸酐，20-40℃下反应1-2h后加热至80-100℃反应5-10min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5-10g/ml与水混合后用10kda-14kda的透析袋透析48-72h，完毕后离心，取上层清液-15～-25℃冷冻干燥冻干12-24h后得丁酰化透明质酸钠；
15.3)三氟乙酰化透明质酸钠的制备：称取0.1-0.5g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50-80ml水中，加入10-12ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入10-12ml三氟乙酸酐，20-40℃下反应1-2h后加热至80-100℃反应5-10min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5-10g/ml与水混合后用10kda-14kda的透析袋透析48-72h，完毕后离心，取上层清液-15～-25℃冷冻干燥冻干12-24h后得三氟乙酰化透明质酸钠。
16.由于透明质酸钠的水溶性很好，且中存在羧基、羟基等多个活性基团，所以发明人通过酸酐与羟基反应在透明质酸钠上引入丁酰基、三氟乙酰基等疏水性基团形成双亲性的透明质酸钠，通过测试发现引入疏水基团的透明质酸钠的抗酶解能力大大增强。
17.所述的保湿剂为甘油、丁二醇、1，3-丙二醇、羟乙基脲、1,2-戊二醇、聚谷氨酸、芦芭油、甜菜碱中的一种或两种及两种以上的混合；
18.优选的保湿剂为甘油、芦芭油的混合，三者质量比为2-3:1。
19.所述皮肤调理剂为卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、鲸蜡醇中的一种或两种及两种以上的混合；优选的皮肤调理剂为质量比为2-3:1-2的氢化大豆卵磷脂和鲸蜡醇的混合。
20.所述中药精华提取物包括如下重量份的组分：10-15份黄芪、10-15份甘草、10-15份人参、10-15份紫芝。
21.所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：
22.(1)称取干燥的黄芪、甘草、人参、紫芝粉碎、过筛混合均匀得中药粉备用；
23.(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:10-20g/ml与水混合，在90-110℃下提取2-3次，每次0.5-1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；
24.(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10-20g/ml与75-90wt％乙醇水溶液混合，在20-40℃下超声提取1-2小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；
25.(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于40-60℃干燥箱中干燥20-24h得中药精华提取物。
26.所述吸收促进剂为氮酮、羧甲基纤维素、薄荷醇、冰片、n-甲基吡咯烷酮中的一种或两种及两种以上的混合。
27.优选的吸收促进剂为质量比为2-3:2-3的薄荷醇与n-甲基吡咯烷酮的混合。
28.本发明还公开了上述透明质酸钠精华液的制备方法，包括如下步骤：
29.s1：将改性透明质酸钠、角鲨烷、蜂胶、保湿剂、水混合均匀，然后升温至70-90℃，保温1-2小时得混合液1；
30.s2：向步骤s1制得的混合液1中加入皮肤调理剂和中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为20-40℃得混合液2；
31.s3：向混合液2中加入吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液。
32.本发明中所用中药组分的说明：
33.黄芪，为豆科植物蒙古黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge.var.mongholicus(bge.)hsiao或膜荚黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge.的干燥根。性甘，微温。归肺、脾经。补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛。产自甘肃省定西市陇西县。
34.甘草，为豆科植物甘草glycyrrhiza uralensis fisch.、胀果甘草glycyrrhiza inflata bat.或光果甘草glycyrrhiza glabra l.的干燥根和根茎。性甘，平。归心、肺、脾、胃经。补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。产自甘肃省定西市陇西县。
35.人参，为五加科植物人参panax ginseng c.a.mey.的干燥根和根茎。性甘、微苦，微温。归脾、肺、心、肾经。具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智功效。用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，气血亏虚，久病虚羸，惊悸失眠，阳痿宫冷。产自吉林省白山市抚松县。
36.紫芝，又名紫灵芝、黑芝、木芝，为多孔菌科真菌赤芝ganoderma lucidum(leyss.exfr.)karst.或紫芝ganoderma sinense zhao，xu et zhang的干燥子实体。性甘，平。归心、肺、肝、肾经。补气安神，止咳平喘。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食。产自山东冠县。
37.本发明的技术构思为：本发明主要从透明质酸钠易于被酶解从而降低其保湿性能出发，对透明质酸钠引入丁酰基、三氟乙酰基进行疏水改性，制备双亲性的透明质酸钠，提高透明质酸钠的抗酶解能力；蜂胶、角鲨烷可以通过修复皮肤屏障、吸收空气中的水分、填
充胶质细胞间的缝隙、阻止或延缓水分蒸发的方式达到良好的保湿效果；添加保湿剂赋予精华液更好的保湿效果；加入皮肤调理剂和吸收促进剂能很好的改善精华液吸收不好的问题，同时添加中药精华提取物通过合理搭配各种中药，通过协同作用有效提高精华液的自身补水能力和锁水能力，减少皮肤缺水引起的衰老。
38.与现有技术相比，本发明的有益效果：
39.1、本发明采用由改性透明质酸钠做原料，避免了透明质酸钠组分单一导致功能局限的缺点，同时能增强透明质酸钠的抗酶解能力；
40.2、采用特定质量比的氢化大豆卵磷脂与鲸蜡醇的混合，可以使透明质酸钠更好的、更紧地与皮肤完美贴合并在皮肤表面铺展，促进透明质酸钠的分子的吸收，同时锁住更多水分。
41.3、本发明中添加的中药精华提取物，以中医君臣佐使为指导进行组方，通过多种中药协同作用，增强细胞活性和皮肤保湿作用，且具有很高的安全性。
具体实施方式
42.下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
43.透明质酸钠：购买自华熙生物科技股份有限公司，型号为ha-tlm，分子量为10kda-1000kda。
44.角鲨烷：购买自武汉拉那白医药化工有限公司，含量为99％，货号为680001，熔点为38℃，密度为0.81g/ml，折射率为1.452，沸点为176℃。
45.蜂胶：购买自长葛市瑞建蜂业有限公司，纯度为99％，色泽为黑褐色，黄酮含量≥14。
46.甘油：购买自济南奥斯利化工有限公司，有效成分含量为99.7％，密度为1.26g/ml。
47.芦芭油：购买自武汉华翔科洁生物技术有限公司，含量为99％，外观为无色透明水溶性低粘度流动性液体。
48.氢化大豆卵磷脂：购买自武汉华翔科洁生物技术有限公司，含量为99％，酸值《40，碘值《10，炽灼残渣《10％，干燥失重《2％，重金属《20ppm。
49.鲸蜡醇：购买自湖北科沃德化工有限公司，有效物质含量为99％，密度为0.8
±
0.1g/cm3，沸点为310.9
±
5.0g/cm3，闪点为135.0
±
0.0℃，熔点为49-51℃。
50.薄荷醇：购买自上海研生实业有限公司，纯度≥98％，熔点为41-43℃。
51.n-甲基吡咯烷酮，购买自广州远达新材料有限公司，外观为无色液体，型号为01。
52.透明质酸酶：购买自上海阿拉丁生化科技股份有限公司，纯度≥300iu/mg，货号为h298749-300un。
53.对比例1
54.一种透明质酸钠精华液的制备方法，包括如下步骤：
55.s1：将6g透明质酸钠、0.5g角鲨烷、0.8g蜂胶、45g保湿剂、60g去离子水混合均匀，然后升温至80℃，保温2小时得混合液1；所述保湿剂为质量比为2:1的甘油和芦芭油的混
合；
56.s2：向步骤s1制得的混合液1中加入9g皮肤调理剂和4g中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为30℃得混合液2；所述皮肤调理剂为质量比为2:1的氢化大豆卵磷脂和鲸蜡醇的混合。
57.s3：向混合液2中加入0.5g吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液；所述吸收促进剂为质量比为2:3的薄荷醇与n-甲基吡咯烷酮的混合。
58.所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：
59.(1)称取干燥的10g黄芪、10g甘草、10g人参、10g紫芝粉碎、过40目筛混合均匀得中药粉备用；
60.(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:20g/ml与水混合，在90℃下提取2次，每次0.5小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；
61.(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10g/ml与75wt％乙醇水溶液混合，在30℃下超声提取1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；
62.(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于60℃干燥箱中干燥24h得中药精华提取物。
63.实施例1
64.一种透明质酸钠精华液的制备方法，包括如下步骤：
65.s1：将6g改性透明质酸钠、0.5g角鲨烷、0.8g蜂胶、45g保湿剂、60g去离子水混合均匀，然后升温至80℃，保温2小时得混合液1；所述改性透明质酸钠为丁酰化透明质酸钠；所述保湿剂为质量比为2:1的甘油和芦芭油的混合；
66.s2：向步骤s1制得的混合液1中加入9g皮肤调理剂和4g中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为30℃得混合液2；所述皮肤调理剂为质量比为2:1的氢化大豆卵磷脂和鲸蜡醇的混合。
67.s3：向混合液2中加入0.5g吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液；所述吸收促进剂为质量比为2:3的薄荷醇与n-甲基吡咯烷酮的混合。
68.所述改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：
69.1)脱乙酰化透明质酸钠的制备：称取5.0g透明质酸钠、3.0g硫酸肼与120ml一水合肼中，搅拌24h至完全溶解得体系1，将体系1加热至60℃保温0.5小时，加入200ml 90wt％乙醇水溶液，出现白色絮状沉淀，过滤，收集滤饼，将滤饼置于60℃干燥箱中干燥8h后，将滤饼加入30ml 5wt％的乙酸水溶液和0.5mol/l的碘酸水溶液的混合液中得体系2，体系2在4℃下反应1h后加入3wt％的碘甲烷水溶液得体系3，体系3在30℃下反应30min后用99wt％乙醚水溶液萃取3次，收集水层，向水层中加入0.5mol/l的氢氧化钠水溶液调节ph值至7得体系4，向体系4中加入200ml 90wt％乙醇水溶液，有白色絮状沉淀析出，过滤收集滤饼，将滤饼按料液比1:10g/ml溶解在水中，用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得脱乙酰化透明质酸钠。
70.2)丁酰化透明质酸钠的制备：称取0.2g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50ml水中，加入10ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入12ml丁酸酐30℃下反应1h后加热至100℃反应5min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5g/ml与水混合后用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得
丁酰化透明质酸钠。
71.所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：
72.(1)称取干燥的10g黄芪、10g甘草、10g人参、10g紫芝粉碎、过40目筛混合均匀得中药粉备用；
73.(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:20g/ml与水混合，在90℃下提取2次，每次0.5小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；
74.(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10g/ml与75wt％乙醇水溶液混合，在30℃下超声提取1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；
75.(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于60℃干燥箱中干燥24h得中药精华提取物。
76.实施例2
77.一种透明质酸钠精华液的制备方法，包括如下步骤：
78.s1：将6g改性透明质酸钠、0.5g角鲨烷、0.8g蜂胶、45g保湿剂、60g去离子水混合均匀，然后升温至80℃，保温2小时得混合液1；所述改性透明质酸钠为三氟乙酰化透明质酸钠；所述保湿剂为质量比为2:1的甘油和芦芭油的混合；
79.s2：向步骤s1制得的混合液1中加入9g皮肤调理剂和4g中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为30℃得混合液2；所述皮肤调理剂为质量比为2:1的氢化大豆卵磷脂和鲸蜡醇的混合。
80.s3：向混合液2中加入0.5g吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液；所述吸收促进剂为质量比为2:3的薄荷醇与n-甲基吡咯烷酮的混合。
81.所述改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：
82.1)脱乙酰化透明质酸钠的制备：称取5.0g透明质酸钠、3.0g硫酸肼与120ml一水合肼中，搅拌24h至完全溶解得体系1，将体系1加热至60℃保温0.5小时，加入200ml 90wt％乙醇水溶液，出现白色絮状沉淀，过滤，收集滤饼，将滤饼置于60℃干燥箱中干燥8h后，将滤饼加入30ml 5wt％的乙酸水溶液和0.5mol/l的碘酸水溶液的混合液中得体系2，体系2在4℃下反应1h后加入3wt％的碘甲烷水溶液得体系3，体系3在30℃下反应30min后用99wt％乙醚水溶液萃取3次，收集水层，向水层中加入0.5mol/l的氢氧化钠水溶液调节ph值至7得体系4，向体系4中加入200ml 90wt％乙醇水溶液，有白色絮状沉淀析出，过滤收集滤饼，将滤饼按料液比1:10g/ml溶解在水中，用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得脱乙酰化透明质酸钠。
83.2)三氟乙酰化透明质酸钠的制备：称取0.2g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50ml水中，加入10ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入12ml三氟乙酸酐30℃下反应1h后加热至100℃反应5min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5g/ml与水混合后用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得三氟酰化透明质酸钠。
84.所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：
85.(1)称取干燥的10g黄芪、10g甘草、10g人参、10g紫芝粉碎、过40目筛混合均匀得中药粉备用；
86.(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:20g/ml与水混合，在90℃下提取2次，每次
0.5小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；
87.(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10g/ml与75wt％乙醇水溶液混合，在30℃下超声提取1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；
88.(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于60℃干燥箱中干燥24h得中药精华提取物。
89.实施例3
90.一种透明质酸钠精华液的制备方法，包括如下步骤：
91.s1：将6g改性透明质酸钠、0.5g角鲨烷、0.8g蜂胶、45g保湿剂、60g去离子水混合均匀，然后升温至80℃，保温2小时得混合液1；所述改性透明质酸钠为质量比为1:2的丁酰化透明质酸钠和三氟乙酰化透明质酸钠的混合；所述保湿剂为质量比为2:1的甘油和芦芭油的混合；
92.s2：向步骤s1制得的混合液1中加入9g皮肤调理剂和4g中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为30℃得混合液2；所述皮肤调理剂为质量比为2:1的氢化大豆卵磷脂和鲸蜡醇的混合。
93.s3：向混合液2中加入0.5g吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液；所述吸收促进剂为质量比为2:3的薄荷醇与n-甲基吡咯烷酮的混合。
94.所述改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：
95.1)脱乙酰化透明质酸钠的制备：称取5.0g透明质酸钠、3.0g硫酸肼与120ml一水合肼中，搅拌24h至完全溶解得体系1，将体系1加热至60℃保温0.5小时，加入200ml 90wt％乙醇水溶液，出现白色絮状沉淀，过滤，收集滤饼，将滤饼置于60℃干燥箱中干燥8h后，将滤饼加入30ml 5wt％的乙酸水溶液和0.5mol/l的碘酸水溶液的混合液中得体系2，体系2在4℃下反应1h后加入3wt％的碘甲烷水溶液得体系3，体系3在30℃下反应30min后用99wt％乙醚水溶液萃取3次，收集水层，向水层中加入0.5mol/l的氢氧化钠水溶液调节ph值至7得体系4，向体系4中加入200ml 90wt％乙醇水溶液，有白色絮状沉淀析出，过滤收集滤饼，将滤饼按料液比1:10g/ml溶解在水中，用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得脱乙酰化透明质酸钠。
96.2)丁酰化透明质酸钠的制备：称取0.2g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50ml水中，加入10ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入12ml丁酸酐30℃下反应1h后加热至100℃反应5min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5g/ml与水混合后用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得丁酰化透明质酸钠。
97.3)三氟乙酰化透明质酸钠的制备：称取0.2g步骤(1)制备的脱乙酰化透明质酸钠溶解于50ml水中，加入10ml饱和nahco3水溶液得体系5，向体系5中加入12ml三氟乙酸酐30℃下反应1h后加热至100℃反应5min，减压旋蒸除去溶剂，将旋蒸后得到的固体按料液比1:5g/ml与水混合后用14kda的透析袋透析72h，完毕后离心，取上层清液-25℃冷冻干燥冻干24h后得三氟酰化透明质酸钠。
98.所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：
99.(1)称取干燥的10g黄芪、10g甘草、10g人参、10g紫芝粉碎、过40目筛混合均匀得中药粉备用；
100.(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:20g/ml与水混合，在90℃下提取2次，每次0.5小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；
101.(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10g/ml与75wt％乙醇水溶液混合，在30℃下超声提取1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；
102.(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于60℃干燥箱中干燥24h得中药精华提取物。
103.测试例
104.抗酶性能测试：称取透明质酸钠1.0g，各加入1ml浓度为862u
·
ml-1
的透明质酸酶溶液，37℃保温降解65h。取1ml酶解液加入4ml99wt％乙醇水溶液，离心15min，取上清液作为甲液；另外准确称取透明质酸钠1.0g，各加入0.5mol/l硫酸水溶液5ml，沸水浴水解15min，加水稀释至50ml作为乙液；精密取甲、乙各1.0ml于具塞试管中，用硫酸咔唑显色法测定糖醛酸的含量。透明质酸钠的抗酶解性用r表示，计算公式为r＝1-0.625m/n，其中m为甲液的糖醛酸含量，n为乙液的糖醛酸含量，实施例3制备的丁酰化透明质酸钠和三氟乙酰化透明质酸钠的性能测试同上。测试结果为透明质酸钠的抗酶解性为39.56％，丁酰化透明质酸钠的抗酶解性为82.12％，三氟乙酰化透明质酸钠的抗酶解性为84.65％。
105.保湿效果测试：测定条件为温度20
±
2℃，相对湿度为50％
±
3％，挑选20-30岁年龄段的皮肤健康无过敏性疾病的受试者40名，所有受试者近一月内没有使用过激素类药物和免疫抑制剂且未参与其他临床试验，受试者分4组，每组10名，选取左前臂内侧相同区域5cm
×
5cm处为受试部位，清洁后，分别均匀涂抹0.1ml对比例1和实施例1-3制得的透明质酸钠精华液，用皮肤水分测试仪测定涂抹样品前及涂抹样品30min后皮肤水分含量，每组样品平行测试3次，计算皮肤水合度增长率。皮肤水合度增长率计算公式如下：
106.皮肤水合度增长率＝(mwv
t-mwv0)/mwv0×
100％
107.mwv0为涂抹样品之前皮肤水分含量，mwv
t
为涂抹t时间后皮肤水分含量。
108.测试所得结果如表1所示：
109.表1：保湿效果测试
[0110][0111]
皮肤水合作用是指皮肤外层角蛋白或其降解产物具有的与水结合的能，水合度是指角质层含水量的多少。水合作用会让皮肤角质层含水量增加，从而阻止变软，胶质细胞充盈，细胞间隙含水量增加，间隙变大，有利于活性成分的经皮渗透。从表1的数据可知，由改性透明质酸钠制备得到的精华液的保湿效果明显强于由普通透明质酸钠制备得到的精华液。可能的原因是对透明质酸钠引入疏水基团后，自组装形成两亲性胶束，通过物理包载的
方式将中药精华提取物及其它原料载入胶束形成的疏水性内核中，提高中药精华提取物及其它原料的溶解性和生物利用度，从而提高了精华液的保湿性能。
[0112]
自由基清除率测试：测试对象为对比例1、实施例1-3制备的透明质酸钠精华液；试剂为1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)、无水乙醇；dpph的配制：准确称取20mg dpph，用95wt％无水乙醇定容至250ml备用；待测试样的配制：分别取20mg对比例1、实施例1-3制备的透明质酸钠精华液，用99.9wt％乙醇水溶液定容至250ml备用。
[0113]
测试步骤为取2ml配制的待测试样及2ml dpph溶液置于带塞的试管中，置于恒温箱中37℃下恒温1h，以99.9wt％乙醇水溶液为空白对照，在紫外分光光度计中波长为517nm下测定各待测试样的吸光度ai，并按下式计算清除率：清除率＝[1-(a
i-aj)/ac]
×
100％
[0114]ac
为2ml 99.9wt％乙醇水溶液加2ml dpph溶液的吸光度；
[0115]ai
为2ml待测试剂加2ml dpph溶液的吸光度；
[0116]aj
为2ml待测试剂加2ml 99.9wt％乙醇水溶液的吸光度；
[0117]
每个待测试样测三组平行样，求平均值，测试结果如表2所示：
[0118]
表2：自由基清除率
[0119] 自由基清除率(％)对比例180.35实施例188.46实施例292.52实施例396.49
[0120]
一般情况下，在自由基的作用下，皮肤中的胶原蛋白会发生反应，使皮肤得不到足够的营养供应，造成皮肤组织活力下降，失去弹性，产生皱纹、肤色暗沉等。从表2的数据可知，所制备的透明质酸钠精华液具有很好的清除自由基的性能。可能的原因是改性后的透明质酸钠的抗酶解能力增强，减缓了透明质酸钠的降解，使其在皮肤中的保存的时间延长，能更充分地与自由基发生反应，自由基能更好地被清除。两种双亲性的透明质酸钠上的亲水基团羟基、羟基发生分子间的反应形成氢键交联结构，抗酶能力更好，使得制得的精华液具有更好的清除自由基的能力。

技术特征：
1.一种透明质酸钠精华液，其特征在于，包括如下重量份的组分：4-8份改性透明质酸钠、0.5-0.8份角鲨烷、0.5-1.0份蜂胶、40-50份保湿剂、5-10份皮肤调理剂、3-5份中药精华提取物、0.1-0.5份吸收促进剂、50-80份水。2.如权利要求1所述的一种透明质酸精华液，其特征在于：所述改性透明质酸钠由丁酰化透明质酸钠与三氟乙酰化透明质酸钠混合而成。3.如权利要求1所述的一种透明质酸精华液，其特征在于：所述改性透明质酸钠由质量比为1:2-3的丁酰化透明质酸钠与三氟乙酰化透明质酸钠混合而成。4.如权利要求1所述的透明质酸钠精华液，其特征在于：所述保湿剂为甘油、丁二醇、1，3-丙二醇、羟乙基脲、1,2-戊二醇、聚谷氨酸、芦芭油、甜菜碱中的一种或两种及两种以上的混合。5.如权利要求1所述的透明质酸钠精华液，其特征在于：所述皮肤调理剂为卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、鲸蜡醇中的一种或两种及两种以上的混合。6.如权利要求1所述的透明质酸钠精华液，其特征在于：所述皮肤调理剂为氢化大豆卵磷脂与鲸蜡醇的混合。7.如权利要求1所述的透明质酸钠精华液，其特征在于，所述中药精华提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)称取干燥的黄芪、甘草、人参、紫芝粉碎、过筛混合均匀得中药粉备用；(2)将步骤(1)所得中药粉按料液比为1:10-20g/ml与水混合，在90-110℃下提取2-3次，每次0.5-1小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l1和滤渣；(3)将步骤(2)所得滤渣按料液比为1:10-20g/ml与75-90wt％乙醇水溶液混合，在20-40℃下超声提取1-2小时，将提取完毕的混合物过滤，分离得滤液l2和滤渣；(4)将滤液l1和l2合并，减压除去溶剂得固体，将固体置于40-60℃干燥箱中干燥20-24h得中药精华提取物。8.如权利要求1所述的透明质酸钠精华液，其特征在于：所述吸收促进剂为氮酮、羧甲基纤维素、薄荷醇、冰片、n-甲基吡咯烷酮中的一种或两种及两种以上的混合。9.如权利要求1～8任一项所述的透明质酸钠精华液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：s1：将改性透明质酸钠、角鲨烷、蜂胶、保湿剂、水混合均匀，然后升温至70-90℃，保温1-2小时得混合液1；s2：向步骤s1制得的混合液1中加入皮肤调理剂和中药精华提取物搅拌均匀后将体系温度降低为20-40℃得混合液2；s3：向混合液2中加入吸收促进剂，搅拌均匀后得到透明质酸钠精华液。

技术总结
本发明提供了一种透明质酸钠精华液及其制备方法。本发明的透明质酸钠精华液包括如下重量份的组分：4-8份改性透明质酸钠、0.5-0.8份角鲨烷、0.5-1.0份蜂胶、40-50份保湿剂、5-10份皮肤调理剂、3-5份中药精华提取物、0.1-0.5份吸收促进剂、50-80份水。本发明中添加了改性透明质酸钠，使得透明质酸钠的抗酶解能力增强，避免的单一组分功能的局限性，制得的精华液具有更好的保湿效果及清除自由基的能力。液具有更好的保湿效果及清除自由基的能力。


技术研发人员：蓝锡伟 何丹农
受保护的技术使用者：杭州梵歌生物科技有限公司
技术研发日：2022.01.18
技术公布日：2022/3/8